[发明专利]沙门氏菌噬菌体尾部受体结合蛋白RBP 41及其在富集与检测沙门氏菌中的应用

权利要求书

1.一种沙门氏菌噬菌体尾部受体结合蛋白RBP 41，其氨基酸序列为SED ID No.1。

2.一种编码权利要求1所述沙门氏菌噬菌体尾部受体结合蛋白RBP 41的基因orf 41，其核苷酸序列如SED ID No.2。

3.一种权利要求1所述尾部受体结合蛋白RBP 41的噬菌体尾部组装伴侣蛋白TAC 34，其氨基酸序列为SED ID No.3。

4.根据权利要求3所述的组装伴侣蛋白TAC 34，其特征在于：所述组装伴侣蛋白TAC 34的编码基因orf 34，其核苷酸序列如SED ID No.4。

5.一种重组表达载体pETDuet-1-orf 34-orf 41，其特征在于：所述重组表达载体pETDuet-1-orf 34-orf 41为含有基因orf 41序列和基因orf 34序列的表达载体，其中，所述表达载体为原核细胞表达载体pETDuet-1；

所述基因orf 41的核苷酸序列如SED ID No.2；所述基因orf 34的核苷酸序列如SEDID No.4。

6.含有权利要求5所述重组表达载体的宿主细胞，其特征在于：所述宿主细胞为大肠杆菌BL21。

7.一种权利要求1所述噬菌体尾部受体结合蛋白RBP 41在快速富集沙门氏菌的磁分离试剂盒以及磁分离酶联免疫法检测沙门氏菌中的应用。

8.利用权利要求6所述含有重组表达载体的大肠杆菌BL21制备噬菌体受体结合蛋白RBP 41的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将含有重组表达载体pETDuet-1-orf 34-orf 41的大肠杆菌感受态细胞BL21培养，用异丙基硫代半乳糖苷诱导后继续培养，离心，沉淀用磷酸盐缓冲液PBS重悬，即为悬浮菌液；

2)对悬浮菌液进行菌体破碎，离心收集上清，经镍柱亲和层析纯化分离，得到重组的噬菌体受体结合蛋白RBP 41。

9.一种沙门氏菌噬菌体尾部受体结合蛋白-磁珠探针RBP 41-MBs的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

1)将羧基化磁珠(200nm)进行活化，得到活化的羧基磁珠MBs；

2)将权利要求8制备的噬菌体受体结合蛋白RBP 41与活化的羧基磁珠进行偶联，得到含有噬菌体受体结合蛋白-磁珠探针RBP 41-MBs的PBS缓冲液，且PBS的摩尔浓度为0.05mol/L，噬菌体受体结合蛋白-磁珠探针RBP 41-MBs的摩尔浓度为2mg/mL。

10.一种基于噬菌体尾部受体结合蛋白的快速富集沙门氏菌磁分离试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括含有权利要求9所述沙门氏菌噬菌体尾部受体结合蛋白-磁珠探针RBP41-MBs。