[发明专利]一种狼疮抗凝物检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种狼疮抗凝物检测试剂盒，包括LA1筛选试剂、LA2确认试剂；LA1筛选试剂包括重组蛇毒酶、重组磷脂、钙离子、第一肝素中和剂、第一缓冲液和第一辅料，LA1筛选试剂为液态；LA2确认试剂包括重组蛇毒酶、重组磷脂、钙离子、第二肝素中和剂、第二缓冲液和第二辅料，LA2确认试剂为液态；LA1筛选试剂中的重组磷脂的含量低于LA2确认试剂中的重组磷脂的含量；本发明将重组蛇毒酶和重组磷脂搭配使用，试剂灵敏度更高，测试阳性或弱阳性样本时，单位时间内的变化幅度要显著增强，提高阳性样本的检出率，降低假阴性；还包括肝素中和剂，消除了肝素的影响，提高准确性；试剂为液态，使用方便、成本低廉、稳定性好。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种狼疮抗凝物检测试剂盒。

背景技术

狼疮抗凝物（lupus anticoagulant，LA）是一组能直接与负电荷磷脂结合，或与磷脂蛋白复合物结合的免疫球蛋白，属于抗磷脂抗体（antiphospholipid antibody，APL）。持续LA阳性患者被认为有较高血栓形成和复发风险，也是不明原因习惯性流产、死胎、易栓性疾病及某些自身免疫性疾病的危险信号；LA还能增强血小板聚集和抑制纤溶活性，故LA阳性患者易出现血栓并发症。

目前检测LA常用的方法为活化部分凝血活酶时间（activated partialthromboplastin time，APTT）、 改良的稀释蝰蛇毒时间（dilute Russell viper venomtime，dRVVT）及二氧化硅凝固时间（silica clotting time，SCT）检测法，通常以筛选试验、混合试验和确认试验传统的三步法来判读是否存在LA，且间隔12周后第二次检测，LA仍为阳性时方可确诊。LA在APS的诊断和治疗中起着非常重要的作用。dRVVT法相比于SCT法的特异性更高，能够精准地反映病人体内第X因子活化之后参与的凝血过程，且不受凝血因子VII，VIII，IX，XI等异常或缺失的影响，抗干扰能力更强，可适用于全自动凝血分析仪，在临床应用中的前景广阔。

但市面上主流的狼疮抗凝物检测试剂盒（dRVVT法）均为冻干粉形态，冻干工艺过于复杂，试剂的瓶间差较大，使用前均需要进行复溶操作，增加了人工操作步骤，并且易受复溶水质，移液器准确性和操作者手法的影响；狼疮抗凝物检测试剂盒（dRVVT法）灵敏度有待提升，尤其是对于待测样本中存在弱LA的情况下，经常会出现假阴性的结果；狼疮抗凝物检测试剂盒（dRVVT法）稳定性有待提升，效期不够长，不利于客户的使用和试剂储存，因此提升试剂的稳定性是非常有必要的；现有狼疮抗凝物检测试剂盒（dRVVT法）抗肝素干扰能力不足，遇到含肝素样本测试时，所得的结果不可信，因此急需提升现有试剂盒的抗肝素干扰能力；狼疮抗凝物检测试剂盒（dRVVT法）大多为国外进口，试剂盒定价昂贵，运输时间久，到货周期长，对医院和患者均造成了一定程度的影响。

发明内容

本发明要解决的技术问题在于，针对现有技术的缺陷，提供一种狼疮抗凝物检测试剂盒，价格低廉、全液体、试剂灵敏度高、便捷、快速、抗干扰能力强、稳定性好、准确性好。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种狼疮抗凝物检测试剂盒，包括LA1筛选试剂、LA2确认试剂；

所述LA1筛选试剂包括重组蛇毒酶、重组磷脂、钙离子、第一肝素中和剂、第一缓冲液和第一辅料，所述LA1筛选试剂为液态；

所述LA2确认试剂包括重组蛇毒酶、重组磷脂、钙离子、第二肝素中和剂、第二缓冲液和第二辅料，所述LA2确认试剂为液态；

所述LA1筛选试剂中的重组磷脂的含量低于所述LA2确认试剂中的重组磷脂的含量。

进一步地，优选所述重组蛇毒酶在所述LA1筛选试剂、LA2确认试剂的含量均为1~3IU/mL。

进一步地，优选所述LA1筛选试剂中的重组磷脂的含量为0.02~0.06%，所述LA2确认试剂中的重组磷脂的含量为0.4~0.8%。