[发明专利]应用熔解曲线检测MMACHC基因高频突变的试剂盒在审
| 申请号： | 202210719458.7 | 申请日： | 2022-06-23 |
| 公开（公告）号： | CN114875134A | 公开（公告）日： | 2022-08-09 |
| 发明（设计）人： | 赵燕;杨海宁;崔亚洲;韩金祥;邹卉 | 申请（专利权）人： | 山东第一医科大学（山东省医学科学院） |
| 主分类号： | C12Q1/6883 | 分类号： | C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广东科信启帆知识产权代理事务所(普通合伙) 44710 | 代理人： | 李波 |
| 地址： | 250117 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 应用 熔解 曲线 检测 mmachc 基因 高频 突变 试剂盒 | ||
1.一种用于检测MMACHC基因高频突变的引物对集，其特征在于，所述引物对集包括第一引物对集、第二引物对集和第三引物对集。
2.根据权利要求1所述的引物对集，其特征在于，所述第一引物对集用于检测MMACHC基因的c.80A＞G、c.217C＞T、c.567dupT突变位点，包括第一上游引物和第一下游引物、第二上游引物和第二下游引物、第三上游引物和第三下游引物，核苷酸序列依次如SEQ IDNO.1-SEQ ID NO.6所示。
3.根据权利要求1所述的引物对集，其特征在于，所述第二引物对集用于检测MMACHC基因的c.482G＞A、c.658_660delAAG突变位点，包括第四上游引物和第四下游引物、第五上游引物和第五下游引物，核苷酸序列依次如SEQ ID NO.7-SEQ ID NO.10所示。
4.根据权利要求1所述的引物对集，其特征在于，所述第三引物对集用于检测MMACHC基因的c.609G＞A位点，包括第六上游引物和第六下游引物，核苷酸序列依次如SEQ IDNO.11-SEQ ID NO.12所示。
5.根据权利要求1-4任一项所述的引物对集，其特征在于，每条引物的Tm值独立地为58～60℃；优选地，所述引物之间的Tm值差异在2℃内。
6.一种应用熔解曲线检测MMACHC基因高频突变的试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒包括权利要求1-5任一项所述的引物对集。
7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒进一步包括扩增反应体系组分、质控品。
8.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述扩增反应体系组分选自FastStartTaq DNA聚合酶、dNTPs、饱和染料、PCR扩增缓冲液、MgCl2和水。
9.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述质控品包括空白质控品、阴性质控品；优选地，所述空白质控品为无酶水；所述阴性质控品为未突变的MMACHC基因质粒。
10.权利要求1-5所述的引物对集或权利要求6-9所述的试剂盒在制备MMACHC高频突变检测产品或装置中的应用。
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