[发明专利]一种深海枝孢菌及其发酵物在制备抗菌药物中的应用

权利要求书

1.一种深海枝孢菌的发酵提取物的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

S1、将深海枝孢菌进行发酵培养，得到发酵液；所述深海枝孢菌是保藏编号为CCTCCM2020614的枝孢菌(Cladosporium cladosporioides)170056；

S2、将步骤S1得到的所述发酵液进行离心，上清液加入乙酸乙酯萃取，将萃取液低压浓缩得到深海枝孢菌发酵粗提物；

S3、将步骤S2得到的所述发酵粗体物进行分离纯化，具体方法为：

1)将所述发酵粗提物用反相ODS柱色谱进行分离，用甲醇-水体系进行梯度洗脱，所述甲醇浓度梯度为5％→100％，依次得到8个馏分：Fr.1～Fr.8；

2)将得到的馏分Fr.4使用葡聚糖凝胶柱色谱进行分离，所述葡聚糖凝胶柱所用流动相为甲醇，得到馏分Fr.4-1；

3)将得到的馏分Fr.4-1使用正相硅胶柱色谱进行分离，用石油醚-乙酸乙酯体系进行梯度洗脱，所述石油醚-乙酸乙酯的浓度梯度为10:1→3:1，得到发酵提取物，所述发酵提取物为10-羟基-顺式-12-十八碳烯酸。

2.如权利要求1所述深海枝孢菌的发酵提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中的发酵培养具体方法为：

1)将所述深海枝孢菌在PDA平板上于28℃培养3～4天，获得深海枝孢菌菌丝体；

2)将所述深海枝孢菌菌丝体接到含有PDB的培养液中，经培养获得种子液；

3)将所述获得的种子液接种到发酵培养基中，于28℃摇床培养11天，得到发酵液；

所述发酵培养基包括20mg/L甘露醇、3mg/L酵母提取粉、5mg/L味精、10mg/L葡萄糖、3mg/L麦芽糖、5mg/L大豆蛋白胨。

3.通过权利要求1或2所述的制备方法得到的深海枝孢菌的发酵提取物在制备预防和/或治疗副溶血性弧菌感染性疾病的药物中应用。