[发明专利]甘露聚糖的制备方法与甘露聚糖

权利要求书

1.一种甘露聚糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：对灭菌后的念珠菌的菌液离心后保留第一上清液；

S2：在所述第一上清液中加入无水乙醇，离心后弃去上清，得到甘露聚糖粗提物；

S3：将所述甘露聚糖粗提物溶于去离子水后加入十六烷基三甲基溴化铵，离心弃去沉淀，得到第二上清液；

S4：调节所述第二上清液的pH至碱性后离心，在所得沉淀中加入酸性溶液，在得到的第一混合物中加入无水乙醇，离心后弃去上清，得到第二沉淀；

S5：在所述第二沉淀中依次加入去离子水和由氯仿和醇组成的有机混合液，离心后弃去沉淀，得到多糖溶液；

S6：对所述多糖溶液依次进行层析和浓缩，得到甘露聚糖纯品。

2.根据权利要求1所述的甘露聚糖的制备方法，其特征在于，所述在所述第一上清液中加入无水乙醇，离心后弃去上清，得到甘露聚糖粗提物的步骤包括：

S21：在所述第一上清液中加入无水乙醇，离心后弃去上清；

S22：在所述步骤S21得到的沉淀中加入去离子水，得到第二混合物；

S23：在所述第二混合物中加入无水乙醇，离心后弃去上清，得到甘露聚糖粗提物。

3.根据权利要求1所述的甘露聚糖的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中，所述无水乙醇与所述第一上清液的体积比为3:1-5:1。

4.根据权利要求2所述的甘露聚糖的制备方法，其特征在于，所述步骤S23中，所述无水乙醇与所述第二混合物的体积比为3:1-5:1。

5.根据权利要求2所述的甘露聚糖的制备方法，其特征在于，所述在所述第一上清液中加入无水乙醇的步骤执行完毕后，将得到的混合物在2-8℃下静置过夜。

6.根据权利要求2所述的甘露聚糖的制备方法，其特征在于，所述在所述第二混合物中加入无水乙醇的步骤执行完毕后，将得到的混合物静置0.5-1.5小时。

7.根据权利要求1所述的甘露聚糖的制备方法，其特征在于，所述将所述甘露聚糖粗提物溶于去离子水后加入十六烷基三甲基溴化铵，离心弃去沉淀，得到第二上清液的步骤包括：

S31：将所述甘露聚糖粗提物用无水乙醇洗涤2-4次；

S32：将洗涤后的所述甘露聚糖粗提物溶于去离子水后加入十六烷基三甲基溴化铵，离心弃去沉淀，得到第二上清液。

8.根据权利要求1所述的甘露聚糖的制备方法，其特征在于，所述将所述甘露聚糖粗提物溶于去离子水后加入十六烷基三甲基溴化铵的步骤包括，将所述甘露聚糖粗提物溶于去离子水后加入十六烷基三甲基溴化铵，直至所述十六烷基三甲基溴化铵的质量浓度为6.2-8.2％。

9.根据权利要求1所述的甘露聚糖的制备方法，其特征在于，所述调节所述第二上清液的pH至碱性后离心，在所得沉淀中加入酸性溶液，在得到的第一混合物中加入无水乙醇，离心后弃去上清，得到第二沉淀的步骤包括：

S41：在所述第二上清液中加入氢氧化钠直至所得混合物的pH为7.8-9.8后离心；

S42：在所述步骤S41所得沉淀中加入冰乙酸溶液，在得到的第一混合物中加入无水乙醇，离心后弃去上清，得到第二沉淀。

10.根据权利要求9所述的甘露聚糖的制备方法，其特征在于，所述冰乙酸溶液的体积浓度为1.5-2.5％。

11.根据权利要求9所述的甘露聚糖的制备方法，其特征在于，所述步骤S42中，所述无水乙醇与所述第一混合物的体积比为3:1-5:1。

12.根据权利要求9所述的甘露聚糖的制备方法，其特征在于，所述在所述第二上清液中加入氢氧化钠直至所得混合物的pH为7.8-9.8的步骤执行完毕后，将所得混合物在2-8℃下静置8-16小时。