[发明专利]一种肝素钠的脱色方法在审
申请号: | 202210745195.7 | 申请日: | 2022-06-29 |
公开(公告)号: | CN115028757A | 公开(公告)日: | 2022-09-09 |
发明(设计)人: | 刘榜惠 | 申请(专利权)人: | 江苏麦德森制药有限公司 |
主分类号: | C08B37/10 | 分类号: | C08B37/10 |
代理公司: | 淮安市科文知识产权事务所 32223 | 代理人: | 邹文玉 |
地址: | 223001*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 肝素钠 脱色 方法 | ||
1.一种肝素钠的脱色方法,其特征在于:包括步骤:
S1:向小肠粘膜溶液中加入小肠粘膜溶液体积0.1%~0.5%的焦亚硫酸钠,搅拌0.5~2小时,得混合液一;
S2:在步骤S1得到的混合液一中加入小肠粘膜重量0.5%的蛋白酶,并将PH值调至8~9后,酶解3~6小时,得小肠酶解液;
S3:再向小肠酶解液中加入小肠酶解液体积0.1~0.5%的氯化钙,搅拌使氯化钙固体溶解;升温至80~95℃,保温絮凝0.5小时;
S4:对絮凝后的酶解液用80~100目的滤网进行过滤,收集滤液,并在滤液中加入树脂进行吸附、洗脱、沉淀得到粗品肝素钠;
S5:将所述粗品肝素钠溶解成4~5%的溶液,在粗品肝素钠溶液中按体积加入0.1%~0.5%的双氧水,pH8~9,25~30℃,进行脱色8~12h,精制得到精品肝素钠。
2.根据权利要求1所述的一种肝素钠的脱色方法,其特征在于:S1所述的小肠粘膜溶液的制作方式为:向新鲜的猪小肠粘膜中加入其重量4~5倍的水;在加水的过程中,按小肠粘膜溶液的体积加入0.1%~0.5%的焦亚硫酸钠,搅拌0.5~2小时,将猪小肠粘膜和焦亚硫酸钠进行分散溶解;并在加水搅拌的过程中升温,升温至50~60℃,保温20~30min。
3.根据权利要求1所述的一种肝素钠的脱色方法,其特征在于:S2所述的加入蛋白酶时,需要将小肠粘膜溶液的温度保温在40~45℃,并保温酶解3~6小时;酶解结束后,向小肠酶解液中按体积加入0.1~0.5%的氯化钙,搅拌使氯化钙固体溶解;升温至80~95℃,保温絮凝0.5小时。
4.根据权利要求1或3所述的一种肝素钠的脱色方法,其特征在于:所述的蛋白酶采用的是2709碱性蛋白酶。
5.根据权利要求1所述的一种肝素钠的脱色方法,其特征在于:S4所述的在滤液中加入树脂进行吸附、洗脱、沉淀得到粗品肝素钠的操作方式为:
S41:将过滤后得到的滤液降温至40~60℃,再在滤液中按20~50克树脂/每公斤黏膜加入阴离子树脂进行吸附,吸附时间达到8小时以上;
S42:吸附完成后,收集树脂;
S43:用2-3倍树脂体积的洗涤液对树脂进行洗涤;
S44:再用2-3倍树脂体积的洗脱液将肝素洗下;
S45:再按照洗脱液体积的1.5倍加入质量浓度为94%的乙醇,充分搅拌后,使其沉淀10小时;
S46:收集并脱水干燥析出物,得到粗品肝素钠。
6.根据权利要求5所述的一种肝素钠的脱色方法,其特征在于:所述洗涤液采用的是浓度为0.3~0.8M的NaCl液体;所述洗脱液采用的是2~3MNaCl液体。
7.根据权利要求1所述的一种肝素钠的脱色方法,其特征在于:S5所述的将粗品肝素钠溶解精制得到精品肝素钠的具体操作方式为:
S51:粗品肝素钠溶解:将粗品肝素钠溶解于5%NaCl溶液得到粗溶液;
S52:在粗溶液中加入粗溶液体积0.1%~0.5%量的双氧水,得到混合液二;
S53:调节由S52得到的混合液二,使其PH值保持在8~9,并将液体的温度控制在25~30℃的环境下静置氧化8~12h;
S54:再按照S53得到液体体积的0.5~0.8倍加入质量浓度为94%的乙醇,充分搅拌后,使其沉淀10小时,脱水并干燥析出物一;
S55:将析出物一按照S51-S54的步骤重复操作,将析出物一进行第2次氧化;
S56:收集并脱水干燥析出物二,得到精品肝素钠;操作完成。
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