[发明专利]一种肝素钠的脱色方法

说明书

一种肝素钠的脱色方法，包括步骤：S1：案体积比向小肠粘膜溶液中加入0.1%～0.5%的焦亚硫酸钠，搅拌0.5～2小时，得到混合液一；S2：将混合液一的PH值调至8～9，再在溶液中加入蛋白酶，酶解3～6小时；S3：再向小肠酶解液中加入0.1～0.5%的氯化钙，搅拌使氯化钠固体溶解；升温至80～95℃，恒温絮凝0.5小时；S4：将得到的混合物进行过滤，收集滤液，并在滤液中加入树脂吸附、洗脱、沉淀得到粗品肝素钠；S5：将所述粗品肝素钠溶解，在粗品肝素钠溶液中加入0.1%～0.5%的氧化剂进行脱色精制，得到精品肝素钠。应用本发明的方法从粗品肝素钠生产环节进行控制，使精制过程中氧化剂的使用量降低70%以上；减少对产品结构的破坏、收率高，活性高。

技术领域

本发明涉及肝素钠纯化方法技术领域，具体涉及一种肝素钠的脱色方法。

背景技术

肝素钠是临床上使用最多、最广泛的抗凝剂，它也存在于动物的肺、血管壁、肠粘膜等组织中，是动物体内一种天然抗凝血物质，在生物体内与蛋白的复合物形式出现。常见的肝素钠脱色方式主要是对粗品肝素钠进行氧化脱色，由于粗品肝素钠提取过程没有对色泽加以控制，粗品肝素中含有大量的有色杂质，呈较深的颜色。

目前国内肝素钠的生产原料主要为猪小肠，肝素钠的颜色产生与提取过程原料的保鲜度以及复杂的反应产物有关，原料不新鲜、不及时抑制生物组织中氧化酶的活性，不但原料产生褐变，还能影响肝素活性。提取过程中的55～95℃高温处理，原料中大量的蛋白质、氨基酸可能发生复杂的美拉德反应，使得溶液颜色变深。以上因素导致粗品肝素钠在精制过程中直接脱色的步骤，如普遍采用的高锰酸钾氧化、双氧水氧化或是两者联用的方式，氧化剂的使用量较大，对肝素钠的结构形成了破坏，降低了产品的品质与收率。

发明内容

本发明提出了一种肝素钠的脱色方法，从粗品肝素钠生产环节进行控制，使精制过程中氧化剂的使用量降低70%以上；减少对产品结构的破坏、收率高，活性高；能有效的解决上述技术问题。

本发明通过以下技术方案实现：

一种肝素钠的脱色方法，包括步骤：

S1：向小肠粘膜溶液中加入小肠粘膜溶液体积0.1%～0.5%的焦亚硫酸钠，搅拌0.5～2小时，得混合液一；

S2：在步骤S1得到的混合液一中加入小肠粘膜重量0.5%的蛋白酶，并将PH值调至8～9后，酶解3～6小时，得小肠酶解液；

S3：再向小肠酶解液中加入小肠酶解液体积0.1～0.5%的氯化钙，搅拌使氯化钙固体溶解；升温至80～95℃，保温絮凝0.5小时；

S4：对絮凝后的酶解液用80～100目的滤网进行过滤，收集滤液，并在滤液中加入树脂进行吸附、洗脱、沉淀得到粗品肝素钠；

S5：将所述粗品肝素钠溶解成4～5%的溶液，在粗品肝素钠溶液中按体积加入0.1%～0.5%的双氧水，pH8～9,25～30℃,进行脱色8～12h,精制得到精品肝素钠。

进一步的，S1所述的小肠粘膜溶液的制作方式为：向新鲜的猪小肠粘膜中加入其重量4～5倍的水；在加水的过程中，按小肠粘膜溶液的体积加入0.1%～0.5%的焦亚硫酸钠，搅拌0.5～2小时，将猪小肠粘膜和焦亚硫酸钠进行分散溶解；并在加水搅拌的过程中升温，升温至50～60℃，保温20～30min。

进一步的，S2所述的加入蛋白酶时，需要将小肠粘膜溶液的温度保温在40～45℃，并保温酶解3～6小时；酶解结束后，向小肠酶解液中按体积加入0.1～0.5%的氯化钙，搅拌使氯化钙固体溶解；升温至80～95℃，保温絮凝0.5小时。

进一步的，所述的蛋白酶采用的是2709碱性蛋白酶。

进一步的，S4所述的在滤液中加入树脂进行吸附、洗脱、沉淀得到粗品肝素钠的操作方式为：

S41：将过滤后得到的滤液降温至40～60℃，再在滤液中按20～50克树脂/每公斤黏膜加入阴离子树脂进行吸附，吸附时间达到8小时以上；