[发明专利]一种快速鉴定细胞种属的检测试剂盒

说明书

本发明属于基因检测领域，涉及一种能够快速鉴定实验室常用细胞的种属是否为人源、小鼠源、大鼠源的试剂盒，可以用来判断细胞是否出现种属混杂的污染。本发明提供了鉴定种属的引物组合物、其应用以及一站式试剂盒，试剂盒同时附有3个种属的阴阳性样本，方便比对结果，检测速度快，引物的特异性好。使用该试剂盒可以完整的进行细胞种属鉴定实验，可以在5小时内，拿到种属鉴定结果，及时对实验进行调整。通常不需要额外操作步骤，并且快速得到种属鉴定结果。

技术领域

本发明属于基因检测领域，涉及一种细胞的种属鉴定试剂盒，具体而言，本发明提供了一种快速检测人、小鼠、大鼠细胞的种属鉴定试剂盒。

背景技术

据统计，约有30％细胞系被交叉污染或错误辨识，因使用了交叉污染或错误辨识的细胞会导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗失败等。来自荷兰内梅亨大学的Willem Halffman和Serge Horbach发表于2017年10月12日PLoS ONE期刊上题为“Theghosts of HeLa：How cell line misidentification contaminates the scientificliterature”的研究，发现3万多篇论文使用了HeLa细胞交叉污染的错误细胞系导致研究结果无效。作为实验对象的细胞系被交叉污染或错误辨识，不仅浪费大量时间、精力和金钱，还可能造成不可挽回的灾难性后果。为此，很多细胞库现在都要对提交来的细胞系进行鉴定，并对细胞系之间的交叉污染进行监测。

2015新版药典中，规定新建细胞系/株、细胞库(MCB、WCB)和生产终末细胞均应进行鉴别试验，以确认为本细胞，且无其他细胞的交叉污染。

细胞鉴别试验方法有多重，包括细胞形态、生物化学法(如同工酶试验)、免疫学检测(如同工酶试验)、免疫学检测(如组织相容性抗原、种特异性免疫血清)、细胞遗传学检测(如染色体核型、标记染色体检测)、遗传标志检测(如DNA指纹图谱，包括短串联重复序列(STR)、限制片段长度多态性(RFLP-PCR)和内含子多态性(EPIC-PCR)法等)以及其他方法(如杂交法、PCR法、报告基因法等)。根据《生物制品生产检定用动物细胞基质制备及鉴定规程》，应至少选择上述一种或几种方法对细胞进行种属和细胞株间及专属特性的鉴别。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供了一种细胞的种属鉴定试剂盒，能够对细胞进行种属和细胞株间及专属特性的鉴别。

本发明要解决的另一个技术问题是提供上述试剂盒在快速、准确的鉴定细胞种属方面的应用。

一方面，本发明提供了一种种属鉴定的引物组合物，所述的引物组合物选自以下的一种或者几种：

mouse-F：ATTACAGCCGTACTGCTCCTAT(SEQ ID NO 1),

mouse-R：CCCAAAGAATCAGAACAGATGC(SEQ ID NO 2),

rat-F：AGACACTCTGACGACTGTCAACA(SEQ ID NO 3),

rat-R：CATGGTAGAGAAAATCTGTTCCG(SEQ ID NO 4),

Human-F：GTGGGCTGAAAAGCTCCCGATTAT(SEQ ID NO 5),

Human-R：GTGATTCCCATTGGCCTGTTCCTC(SEQ ID NO 6),

优选地，所述的引物组合物。例如，所述的引物组合物选自以下的一对或者几对：

第一对：mouse-F：ATTACAGCCGTACTGCTCCTAT和mouse-R：CCCAAAGAATCAGAACAGATGC，