[发明专利]一种塑性包埋试剂盒及制备方法、及其应用

权利要求书

1.一种塑性包埋试剂盒，其特征在于：包括A液和B液，所述A液为HM20树脂，包含丙烯酸酯类单体和交联剂，所述丙烯酸酯类单体占体系总质量的82.5%，所述交联剂占体系总质量的17.5%，两者混合溶解；所述B液为经过提纯的偶氮二异丁腈，所述塑性包埋试剂盒中的HM20包埋树脂试剂由A液和B液混合溶解既得。

2.根据权利要求1所述的塑性包埋试剂盒，其特征在于，所述交联剂为三乙二醇二甲基丙烯酸酯。

3.根据权利要求1所述的塑性包埋试剂盒，其特征在于，100%浓度的所述HM20包埋树脂试剂中，所述由A液和B液的质量比为2500:4，其余浓度的所述HM20包埋树脂试剂使用无水乙醇稀释。

4.根据权利要求1至3任一所述的塑性包埋试剂盒的制备方法，其特征在于，分别制备A液和B液，再将所述A液和B液按比例混合溶解既得，

所述A液的制备方式为：首先使用玻璃层析柱对丙烯酸酯类单体和交联剂分别进行过滤，在层析柱的出口处塞入些许脱脂棉，加入碱性氧化铝粉末，盖上塞子缓慢通入氮气，滤除树脂中阻聚剂，再将所述丙烯酸酯类单体和交联剂按比例混合溶解既得；

所述B液的制备方式为：首先使用冷凝管、锥形瓶、80℃水浴加热95%高浓度酒精，立刻加入偶氮二异丁腈，摇荡使其溶解，立刻抽滤，待冷却12-25小时后得到白色偶氮二异丁腈晶体，用漏斗抽滤，存于棕色器皿中干燥至少24小时，后置于真空烘箱中干燥24小时既得。

5.根据权利要求4所述的塑性包埋试剂盒的制备方法，其特征在于，100%浓度的所述HM20包埋树脂试剂将所述A液和B液按2500:4的质量比混合溶解既得，其余浓度的所述HM20包埋树脂试剂使用无水乙醇稀释。

6.根据权利要求1所述的塑性包埋试剂盒的应用，其特征在于，制成HM20包埋树脂试剂明胶胶囊。

7.根据权利要求6所述的塑性包埋试剂盒的应用，其特征在于，适用于不同尺寸生物组织，直径分别为9.55mm、8.18mm、13mm等。

8.根据权利要求6所述的塑性包埋试剂盒的应用，其特征在于，

对生物样本进行预处理；

对预处理后的生物样本进行梯度脱水和梯度浓度渗透；

将渗透处理后的生物样本置于明胶胶囊，随后在胶囊中缓慢加入所述100%浓度的所述HM20包埋树脂试剂，使其充满胶囊，随后在38-50℃条件下加热聚合24-48小时。

9.根据权利要求8所述的塑性包埋试剂盒的应用，其特征在于，对生物样本进行预处理包括：

将生物样本在4℃预冷却的多聚甲醛固定液中固定24-48小时；

将固定好的生物样本在漂洗液中漂洗12-24小时。

10.根据权利要求9所述的塑性包埋试剂盒的应用，其特征在于，对预处理后的生物样本进行梯度脱水和梯度浓度渗透包括，

将所述漂洗好的生物样本依次放入4℃预冷却的50%、70-75%和85-95%乙醇和无水乙醇中进行梯度脱水，每个梯度1-2小时；

完成脱水处理后，进行梯度浓度渗透，具体包括

将试剂盒中A液和B液按比例混合搅拌30min既得100%浓度的HM20包埋树脂试剂，所述丙烯酸酯类单体占体系总质量的82.5%，使用无水乙醇稀释所述100%浓度的HM20包埋树脂试剂，获取梯度浓度的HM20包埋树脂试剂，分别为第一梯度50%、第二梯度70%-75%、第三梯度100%；

将所述梯度脱水后的生物样本，依次放入4℃预冷却的分别为50%、70%-75%、100%浓度的HM20包埋树脂试剂中，每个梯度2-24小时，置换乙醇溶液，使包埋剂完全渗透入生物样本中。