[发明专利]一种影响猪肌内脂肪含量性状的分子标记及应用

权利要求书

1.一种影响猪肌内脂肪含量性状的分子标记，其特征在于：该分子标记位于ADIG基因中，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示，该分子标记的核苷酸序列的202bp处存在一个GA突变位点。

2.一种用于获得权利要求1所述分子标记的引物对，其特征在于：该引物对为：

正向引物：5’-CAGCCTCTGCCCACTCAT-3’

负向引物：5’-CTGGGACTCTAGGTTAAGAAAT-3’。

3.一种权利要求1所述分子标记的获得办法，其特征在于：以硒都黑猪基因组DNA为模板，采用以下引物对：

正向引物：5’-CAGCCTCTGCCCACTCAT-3’

负向引物：5’-CTGGGACTCTAGGTTAAGAAAT-3’

进行PCR扩增，其获得的分子标记为SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2。

4.一种利用权利要求1所述分子标记鉴定猪肌内脂肪含量性状的方法，其特征在于：包括以下步骤：

1)引物对的设计

根据猪ADIG基因的基因组序列(GenBank登陆号：NC_010459.5)设计以下引物对：

正向引物ADIG-E1-F：5'CAGCCTCTGCCCACTCAT 3'，

反向引物ADIG-E1-R：5'CTGGGACTCTAGGTTAAGAAAT 3'；

2)PCR扩增

利用上述引物在硒都黑猪混合基因组DNA池中进行PCR扩增，PCR反应体系50μL，体系中各组分的浓度为100ng模板DNA、10×buffer(含Mg2+)4μL、上述上下游引物各0.5μM、2.5μMdNTPs、1U TaqDNA聚合酶；

PCR的运行程序为：95℃预热2min；94℃变性20s，58℃退火40s，72℃延伸60s，共35个循环；72℃延伸10min；4℃保存，PCR产物用1.5％琼脂糖凝胶电泳检测；

3)PCR产物纯化及测序，通过得到如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2的核苷酸序列确定分子标记的基因型。

5.一种权利要求1所述分子标记在猪肌内脂肪含量性状相关分子标记辅助育种中的应用，其特征在于：携带GA杂合基因型个体肌内脂肪含量高于其他基因型个体。