[发明专利]一种检测3-(N-亚硝基甲氨基)丙腈含量的液相色谱分析方法

说明书

本公开涉及一种检测3‑(N‑亚硝基甲氨基)丙腈含量的液相色谱分析方法，所述液相色谱分析方法包括如下步骤：(1)制备标准溶液，并确定3‑(N‑亚硝基甲氨基)丙腈的标准曲线，在所述标准曲线中，Y为5.50‑6.00min和6.30‑6.80min对应的峰面积之和；(2)利用液相色谱分析方法对待测样本进行检测，在得到的色谱图中，目标物对应的峰面积为5.50‑6.00min和6.30‑6.80min对应的峰面积之和。本公开提供的分析方法创造性的将异构体同样纳入对3‑(N‑亚硝基甲氨基)丙腈含量的检测中，能够极大程度的避免“假合格”的现象。

技术领域

本公开涉及化合物含量检测技术领域，尤其涉及一种检测3-(N-亚硝基甲氨基)丙腈含量的液相色谱分析方法，特别是一种检测槟榔中3-(N-亚硝基甲氨基)丙腈含量的液相色谱分析方法。

背景技术

亚硝胺类杂质属于ICH M7(R1)(《评估和控制药物中DNA反应性(致突变)杂质以限制潜在致癌风险》)指南中提及的“关注队列”物质。根据世界卫生组织公布的致癌物清单，3-(N-亚硝基甲氨基)丙腈为2B类致癌物。

3-(N-亚硝基甲氨基)丙腈的结构式如下：

槟榔中含有多种人体所需的营养元素和有益物质，且由于其具有“杀虫、破积、降气行滞、行水化湿”的功效，曾被用来治疗绦虫、钩虫、蛔虫、绕虫、姜片虫等寄生虫感染”，包含槟榔的四磨汤主治“七情气逆，上气喘急，妨闷不食”。槟榔的经济价值高，能够进行深加工各种产品，但是其成分中含有一定量的3-(N-亚硝基甲氨基)丙腈，由于3-(N-亚硝基甲氨基)丙腈被列为2B类致癌物，因此，需要限制产品中3-(N-亚硝基甲氨基)丙腈的含量，目前，对于3-(N-亚硝基甲氨基)丙腈的检测较少，且容易出现“假合格”的现象。

因此，想要提供一种能够准确检测3-(N-亚硝基甲氨基)丙腈含量的方法。

发明内容

为了解决上述技术问题，本公开提供了一种检测3-(N-亚硝基甲氨基)丙腈含量的液相色谱分析方法。

第一方面，本公开提供了一种检测3-(N-亚硝基甲氨基)丙腈含量的液相色谱分析方法，所述液相色谱分析方法包括如下步骤：

(1)制备标准溶液，并确定3-(N-亚硝基甲氨基)丙腈的标准曲线，在所述标准曲线中，Y为5.50-6.00min和6.30-6.80min对应的峰面积之和；

(2)利用液相色谱分析方法对待测样本进行检测，在得到的色谱图中，目标物对应的峰面积为5.50-6.00min和6.30-6.80min对应的峰面积之和。

在对标准溶液的液相色谱检测得到的色谱图中，鉴于不同液相色谱仪、不同检测时间以及不同检测人员等原因出现的允许范围内的正常波动，本公开将3-(N-亚硝基甲氨基)丙腈的色谱峰的出峰时间限定在5.50-6.00min，其异构体的出峰时间限定在6.30-6.80min。

在目前现有对3-(N-亚硝基甲氨基)丙腈的检测中，通常仅检测目标物本身的含量，而本公开发现，3-(N-亚硝基甲氨基)丙腈与其异构体在一定条件下能够相互转化，且转化条件极为简单，因此，在对3-(N-亚硝基甲氨基)丙腈含量的检测中，本公开创造性的将3-(N-亚硝基甲氨基)丙腈异构体的浓度也纳入本公开提供的检测方法中，进而避免了在检测结束后，3-(N-亚硝基甲氨基)丙腈与其异构体相互转化而导致的检测不准的情况。

在本公开中，所述液相色谱检测参数包括：

色谱柱为Thermo Hypersil GOLD^TM，流动相为含有乙腈和甲酸的水溶液，流速为0.8-1.2mL/min，检测波长为230nm，柱温为35-45℃。