[发明专利]降压肽或中国蛤蜊降压肽提取物及其应用

说明书

本发明公开了中国蛤蜊降压肽及其在制备降血压药物和保健食品中的应用。中国蛤蜊降压提取物经酶解获得，对该提取物进一步分离纯化得到一特定序列的多肽，该降压肽的氨基酸序列为Lys‑Asp‑Glu‑Tyr‑Lys‑His‑Leu‑Asn‑Phe‑Gly‑Glu‑Val(KDEYKHLNFGEV)。本发明公开的中国蛤蜊降压肽具有显著的血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme，ACE)抑制活性。在体外表现为温度、pH、模拟胃肠消化和血管紧张素转化酶(ACE)降解稳定性。在体外和非自发性高血压大鼠(SHRs)体内都显示出良好的降压效果，可用于高血压治疗相关的保健品和药品。

技术领域

本发明涉及生物活性肽技术领域，涉及中国蛤蜊的降压肽提取物和具有特定序列的降压肽及其在降血压药品和保健品方面的应用。

背景技术

高血压以人体循环动脉血压升高为主要特征(高压≥140mmHg，低压≥ 90mmHg)，高血压与心血管疾病和糖尿病的死亡率增加有关。世界卫生组织(WHO)报道，每年有超过1750万人死于心血管疾病。高血压已经变成了全球的主要死亡原因。肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)和激肽-缓激肽系统(kallikreo-bradykinin system,KKS)可在血压调节中发挥重要作用。血管紧张素转化酶(ACE)是普遍存在于哺乳动物组织中的能够调控肾素-血管紧张素系统(RAS)和激肽-缓激肽系统 (KKS)的一种Zn²⁺依赖性的羧肽酶。所以，ACE被认为是治疗高血压的重要靶点。

市场上普遍的ACE抑制药物多为“普利”类，像卡托普利(captopril)、赖诺普利(lisinopril)、依那普利(enalapril)、福辛普利(fosinopril)等，尽管这些药物能发挥好的降压效果，但是，他们也会产生一系列的副作用，像咳嗽、皮疹、恶心、急性肾功能衰竭、蛋白尿等。这些副作用会降低患者的依从性，增加额外医疗费用，因此越来越多的研究开始集中于对低毒性的天然ACE抑制肽的开发来作为抗高血压药物的辅助和替代品。食源性的多肽不仅能发挥同样的抗压作用还因为其天然来源具有安全性和低毒性，所以从天然食品中开发降压肽具有意义和前景。

中国蛤蜊，俗名“黄蚬子”、“黄蛤”、“飞蛤”，学名Mactra chinensis，隶属于软体动物门、瓣鳃纲、异柱目、蛤蜊科、蛤蜊属，主要分布在我国辽宁、山东的黄、渤海沿岸。人工养殖时常年均可采捕，尤以深秋和春季采捕效果为佳。中国蛤蜊适于生活在潮间带的细砂滩至水深60m的浅海区，是一种营养丰富、肉质鲜美的实用经济滩涂贝类。目前已经有多种从海洋贝类中筛选出具有ACE抑制作用的多肽，像牡蛎、扇贝、菲律宾蛤仔等。但很少有从中国蛤蜊中分离ACE抑制肽的报道。

发明内容

鉴于此，本发明的目的是选择中国蛤蜊作为原料，通过蛋白酶K酶解，液质连用技术，鉴定出氨基酸序列为 Lys-Asp-Glu-Tyr-Lys-His-Leu-Asn-Phe-Gly-Glu-Val(KDEYKHLNFGEV)的 ACE抑制肽。

本发明的中国蛤蜊降压肽：

Lys-Asp-Glu-Tyr-Lys-His-Leu-Asn-Phe-Gly-Glu-Val(KDEYKHLNFGEV)在体外显示较高的血管紧张素转化酶(ACE)抑制作用，在自发性高血压大鼠(SHRs)体内发挥良好的降压效果。

本发明的另个一个目的是提供一种中国蛤蜊降压肽提取物，其按照以下方法制备：将中国蛤蜊粉碎匀浆，加入中国蛤蜊重量0.5-20倍的纯化水，加入蛋白酶K进行酶解，离心过滤之后取上清液，经截留分子量为180道尔顿的纳滤脱盐，浓缩，将浓缩液冻干或喷雾干燥,获得中国蛤蜊酶解降压肽提取物。其中蛋白酶K添加量为中国蛤蜊重量的0.2％-5％，酶解温度控制在35℃-55℃，酶解pH控制在7.0-9.0，酶解时间为2h-5h，酶解结束后沸水10-60min灭酶。

本发明中的中国蛤蜊降压肽提取物及中国蛤蜊降压肽在血管紧张素抑制剂，降压药物及保健品中有广泛的应用。