[发明专利]一种难裂解细菌基因组DNA提取方法在审
| 申请号： | 202210761189.0 | 申请日： | 2022-06-30 |
| 公开（公告）号： | CN114958831A | 公开（公告）日： | 2022-08-30 |
| 发明（设计）人： | 崔大祥;李雪玲;田静;仲禺俊;沈琦 | 申请（专利权）人： | 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司;国纳纳米技术研究（河北）有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12N1/06;C12Q1/6806;C12R1/085 |
| 代理公司： | 上海东亚专利商标代理有限公司 31208 | 代理人： | 董梅 |
| 地址： | 201109 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 裂解 细菌 基因组 dna 提取 方法 | ||
1.一种难裂解细菌基因组DNA提取方法，该方法包括以下步骤：
（1）设定压力、高压时间、低压时间和循环参数；
（2）将含有难裂解细菌基因组DNA的样本置于裂解缓冲液中，放入能够持续承受压力的装置，根据设定的参数进行高压、低压快速循环；
（3）获得裂解的细菌基因组DNA；
所述的压力参数为5-35 kpsi，所述的高压时间参数为1-99s，所述的低压时间参数为1-99s，所述的循环参数为1-99。
2.根据权利要求1所述的难裂解细菌基因组DNA提取方法，其特征在于，所述的压力参数为35 kpsi。
3.根据权利要求1所述的难裂解细菌基因组DNA提取方法，其特征在于，所述的高压时间参数为10s。
4.根据权利要求1所述的难裂解细菌基因组DNA提取方法，其特征在于，所述的低压时间参数为10s。
5.根据权利要求1所述的难裂解细菌基因组DNA提取方法，其特征在于，所述的循环参数为14。
6.根据权利要求1所述的难裂解细菌基因组DNA提取方法，其特征在于，步骤（2）中，所述的样本含有蜡样芽孢杆菌。
7.根据权利要求1所述的难裂解细菌基因组DNA提取方法，其特征在于，所述的难裂解细菌基因组DNA提取方法包括DNA分离或者纯化的步骤，对步骤（3）获得裂解的细菌基因组DNA进行分离或者纯化。
8.根据权利要求7所述的难裂解细菌基因组DNA提取方法，其特征在于，所述的DNA纯化选自CTAB法或者试剂盒法。
9.根据权利要求1所述的难裂解细菌基因组DNA提取方法，其特征在于，所提取的细菌基因组DNA符合酶切、PCR、实时荧光PCR、LAMP、文库构建、Southern杂交、芯片检测、高通量测序中的一项或者多项的要求。
10.根据权利要求1所述的难裂解细菌基因组DNA提取方法，其特征在于，所述的裂解缓冲液使用水代替。
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