[发明专利]一种异环磷酰胺原料药中异环磷酰胺、杂质E、杂质G的检测方法

说明书

本发明公开了一种异环磷酰胺原料药中异环磷酰胺、杂质E、杂质G的检测方法，所述检测方法是采用液相色谱‑质谱联用法进行检测，所述异环磷酰胺的检测限为0.005μg/mL，杂质E的检测限为0.125μg/mL，杂质G的检测限为0.002μg/mL，本发明采用的液相色谱‑质谱联用法对异环磷酰胺原料药中主成分以及相关物质进行检测，为解决异环磷酰胺原料药中异环磷酰胺、杂质E、杂质G的检测问题，提供了一种高效、准确、快速的检测方法，具有方法简便、精密度高、重现好等优点，能够快速、准确地对异环磷酰胺原料药进行检测，整个操作过程可靠、可控，适用于实际应用和推广，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，尤其涉及一种异环磷酰胺原料药中异环磷酰胺、杂质E、杂质G的检测方法。

背景技术

异环磷酰胺，简称IF，是结构上与环磷酰胺相似的烷化类氧氮磷环类药物，化学名称为3-(2-氯乙基)-2-[(2-氯乙基)氨基]四氢-2H-1,3,2-噁磷-2-氧化物，是一种前体药物，在肝内经酶转化为具有细胞毒活性的代谢物，从而能与DNA链发生不可逆的交联，干扰DNA的合成。目前主要适用于软组织肿瘤、睾丸肿瘤、恶性淋巴瘤、肺癌、乳腺癌、卵巢癌、子宫颈癌及儿童肿瘤。在现代异环磷酰胺生产过程中，会引入一些有关物质，这些物质会影响活性成分的纯度，难以保障用药安全。因此，迫切需要开发一种能够实现对异环磷酰胺原料药中主成分以有关物质的检测方法，对异环磷酰胺的质量控制具有重要的意义。

发明内容

本发明针对异环磷酰胺原料药中异环磷酰胺、杂质E、杂质G的检测，提出了一种具有优异的灵敏度、精密度和线性关系的检测方法，具体技术方案如下：

一种异环磷酰胺原料药中异环磷酰胺、杂质E、杂质G的检测方法，所述检测方法是采用液相色谱-质谱联用法进行检测，所述异环磷酰胺为异环磷酰胺，所述异环磷酰胺、杂质E、杂质G结构分别如式I、II、III所示：

所述异环磷酰胺的检测限为0.005μg/mL，杂质E的检测限为0.125μg/mL，杂质G的检测限为0.002μg/mL。

进一步的，所述检测步骤如下：

(1)溶液的配制：包括空白溶液、对照品储备液、对照品溶液、供试品储备液、供试品溶液，其中：

空白溶液：5％甲醇水溶液作为稀释剂；

对照品储备液：精密称定异环磷酰胺、杂质E、杂质G对照品，分别置于10mL棕色容量瓶中，用稀释剂稀释定容至刻度，摇匀制得浓度均为1.0mg/mL的异环磷酰胺、杂质E、杂质G对照品储备液；精密量取异环磷酰胺、杂质E、杂质G对照品储备液0.1mL，置于100mL棕色容量瓶中，用稀释剂稀释定容至刻度，摇匀制得异环磷酰胺、杂质E、杂质G浓度为1000ng/mL的对照品储备液二；

对照品溶液：精密量取异环磷酰胺、杂质E对照品储备液二各0.1mL、杂质G对照品储备液二0.1μL置于100mL棕色容量瓶中，用稀释剂稀释定容至刻度，摇匀制得异环磷酰胺、杂质E为1ng/mL、杂质G为0.01ng/mL的对照品溶液；

供试品储备液：取异环磷酰胺原料药，精密称定，置于10mL棕色容量瓶中，用稀释剂稀释定容至刻度，摇匀制得浓度为1.0mg/mL供试品储备液；精密量取供试品储备液0.1mL，置于100mL棕色容量瓶中，用稀释剂稀释定容至刻度，摇匀制得1000ng/mL供试品储备液二；

供试品溶液：精密量取4mL供试品储备液二置于100mL棕色容量瓶中，稀释剂稀释定容至刻度摇匀，制得异环磷酰胺约40ng/mL供试品溶液。