[发明专利]新型人精子冷冻保护剂制备方法在审
| 申请号： | 202210783054.4 | 申请日： | 2022-07-05 |
| 公开（公告）号： | CN115024309A | 公开（公告）日： | 2022-09-09 |
| 发明（设计）人： | 傅龙龙;卢文红;周芳;谷翊群 | 申请（专利权）人： | 国家卫生健康委科学技术研究所 |
| 主分类号： | A01N1/02 | 分类号： | A01N1/02 |
| 代理公司： | 北京世誉鑫诚专利代理有限公司 11368 | 代理人： | 郭官厚 |
| 地址： | 100081 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 新型 人精 冷冻 保护 制备 方法 | ||
1.新型人精子冷冻保护剂制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1制备GEYC冷冻保护剂；
S2向GEYC冷冻保护剂中加入7水硫酸锌，得到该新型人精子冷冻保护剂。
2.如权利要求1所述的新型人精子冷冻保护剂制备方法，其特征在于：所述步骤S1中，制备GEYC冷冻保护剂，包括以下步骤：
S11在枸橼酸二水中加适量无菌蒸馏水，得到3％枸橼酸钠；
S12量取39mL3％枸橼酸钠放入反应容器中，加入1.5g氨基乙酸，加入39mL5％葡萄糖注射液和15ml甘油，充分混匀、溶解、过滤后，加入20ml新鲜卵黄，得到保护剂粗品；
S13将保护剂粗水浴搅拌，控制pH值在7.2～7.4范围内，细菌检测和精子毒性检测均合格后，得到该新型人精子冷冻保护剂，分装保存。
3.如权利要求2所述的新型人精子冷冻保护剂制备方法，其特征在于：所述步骤S11中，称量3.418g枸橼酸二水，加无菌蒸馏水至100mL，得到3％枸橼酸钠。
4.如权利要求2所述的新型人精子冷冻保护剂制备方法，其特征在于：所述步骤S12中，过滤设备为0.22μm微孔滤器。
5.如权利要求2所述的新型人精子冷冻保护剂制备方法，其特征在于：所述步骤S12中，新鲜卵黄提取方法为：选用SPF级鸡蛋3个～5个，清洗鸡蛋后，用75％酒精消毒蛋壳，保持卵黄完整的前提下，留取卵黄，去除蛋清，选用10mL灭菌注射器刺破卵黄膜，吸取卵黄。
6.如权利要求2所述的新型人精子冷冻保护剂制备方法，其特征在于：所述步骤S13中，水浴温度为56℃，时间为40min。
7.如权利要求2所述的新型人精子冷冻保护剂制备方法，其特征在于：所述步骤S13中，分装包括：
在超净台内，将新型人精子冷冻保护剂以2mL/管分装于玻璃瓶内。
8.如权利要求2所述的新型人精子冷冻保护剂制备方法，其特征在于：所述步骤S13中，保存温度为-70℃，避免反复冻融，且使用时间不超过3个月。
9.如权利要求1所述的新型人精子冷冻保护剂制备方法，其特征在于：所述步骤S13中，所述7水硫酸锌加入量为1.435*10-7g。
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