[发明专利]一种O型口蹄疫疫苗候选株及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 202210793288.7 | 申请日： | 2022-07-07 |
| 公开（公告）号： | CN115896043B | 公开（公告）日： | 2023-06-20 |
| 发明（设计）人： | 李平花;孙普;查晶晶;卢曾军;袁红;李冬;包慧芳;曹轶梅;白兴文;付元芳;马雪青;李坤;赵志荀;刘在新 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;C12N15/42;C12N15/62;C12N15/85;A61K39/135;A61P31/14;C12R1/93 |
| 代理公司： | 兰州智和专利代理事务所(普通合伙) 62201 | 代理人： | 张英荷 |
| 地址： | 730000 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 口蹄疫 疫苗 候选 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种O型口蹄疫疫苗候选株，其特征在于：以重组口蹄疫病毒rHN/XJ的全长感染性克隆pQSA为骨架，嵌合了O/SCGH/CHA/2016毒株的G-H环基因所得；所述重组口蹄疫病毒rHN/XJ的全长感染性克隆PQSA是以口蹄疫疫苗毒株O/HN/CHA/93的全长感染性克隆pOFS为骨架，嵌合了口蹄疫流行毒株O/XJ/CHA/2017的L+P1基因所得；
所述O/SCGH/CHA/2016毒株的G-H环基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示；所述O/XJ/CHA/2017毒株的L+P1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。
2.一种根据权利要求1所述O型口蹄疫疫苗候选株的构建方法，包括以下步骤：
(1)以口蹄疫疫苗毒株O/HN/CHA/93半长质粒pSK-Z123为模板，人工合成含口蹄疫流行毒株O/XJ/CHA/2017L+P1基因的重组质粒pSK-Z123XJLP1；
(2)以步骤(1)合成的重组质粒pSK-Z123XJLP1为模板，人工合成含O型口蹄疫病毒O/SCGH/CHA/2016G-H环基因嵌合的重组质粒pSK-Z123XJLP1/SCGH；合成的质粒用SpeⅠ和BglⅡ限制性内切酶消化后回收约5400bp的目的片段，并将其插入用SpeⅠ和BglⅡ限制性内切酶消化的pOFS质粒中，得到重组全长质粒pQSQ；
(3)将NotI线化的重组全长质粒pQSQ转染BSR/T7细胞，拯救重组口蹄疫病毒，得到O型口蹄疫疫苗候选株rHN/XJ/SCGH。
3.一种基于权利要求1所述的O型口蹄疫疫苗候选株或权利要求2所述构建方法构建的O型口蹄疫疫苗候选株在制备O型口蹄疫疫苗中的应用。
4.根据权利要求3所述的O型口蹄疫疫苗候选株在制备O型口蹄疫疫苗中的应用，其特征在于：所述O型口蹄疫疫苗的防控对象为O/XJ/CHA/2017、O/Tibet/99、O/NXYCh/CHA/2018、O/SCGH/CHA/2016病毒株。
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