[发明专利]将单个核细胞直接重编程为诱导性间充质干细胞的方法在审
| 申请号： | 202210794014.X | 申请日： | 2022-07-07 |
| 公开（公告）号： | CN115287264A | 公开（公告）日： | 2022-11-04 |
| 发明（设计）人： | 张孝兵 | 申请（专利权）人： | 苏州吉纳星辰生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/85;C12N5/078 |
| 代理公司： | 重庆上义众和专利代理事务所(普通合伙) 50225 | 代理人： | 郭维 |
| 地址： | 215000 江苏省苏州*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 单个 细胞 直接 编程 诱导性 间充质 干细胞 方法 | ||
1.将单个核细胞直接重编程为诱导性间充质干细胞的方法，其特征在于，包括：重编程得到的细胞能够表达典型的间充质干细胞表面标志物，并具有分化为成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞的三系分化潜能。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述单个核细胞来源于人体外周血。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，重编程载体包括游离型质粒载体以及非整合型载体。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述游离型载体骨架来自EBV核抗原(EBNA)/顺式作用复制起点(oriP)游离型载体质粒。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，重编程因子包括八聚体结合转录因子(OCT4)、性别决定区Y框蛋白9(SOX9)、原癌基因bHLH转录因子(MYC)、Kruppel样因子4(KLF4)以及抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-特大(BCL-XL)。
6.根据权利要求1或5所述的方法，其特征在于，由脾脏病灶形成病毒启动子(SFFV)启动所述重编程因子的表达。
7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，在所述载体中加入土拨鼠肝炎病毒转录后调节元件(wpre)，对所述重编程因子进行转录后调控。
8.根据权利要求5所涉及的重编程因子，其特征在于，所述SOX9可用性别决定区Y框蛋白2(SOX2)替代。
9.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述OCT4、BCL-XL和MYC可重编程形成iMSC集落。
10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，重编程过程具体涉及一种细胞核转染技术，包括但不仅限于电穿孔方法。
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