[发明专利]制备L-酪氨酸的重组菌及制备方法

权利要求书

1.一种重组菌，其特征在于：所述重组菌能利用L-乳酸和苯酚制备L-酪氨酸。

2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于：所述重组菌表达乙醇酸氧化酶和酪氨酸酚裂解酶。

3.根据权利要求2所述的重组菌，其特征在于：

所述乙醇酸氧化酶选自下述a1)-a3)中任一种蛋白质：

a1)、氨基酸序列是SEQ ID No.4的蛋白质；

a2)、将a1)所示的蛋白质经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与a1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且具有乙醇酸氧化酶活性的蛋白质；

a3)、在a1)或a2)的N末端或/和C末端连接蛋白标签得到的融合蛋白质；

所述酪氨酸酚裂解酶选自下述a4)-a6)中任一种蛋白质：

a4)、氨基酸序列是SEQ ID No.6的蛋白质或氨基酸序列是SEQ ID No.5的蛋白质或氨基酸序列是SEQ ID No.7的蛋白质；

a5)、将a4)所示的蛋白质经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与a1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且具有酪氨酸酚裂解酶活性的蛋白质；

a6)、在a4)或a5)的N末端或/和C末端连接蛋白标签得到的融合蛋白质。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的重组菌，其特征在于：所述重组菌的构建方法包括将所述乙醇酸氧化酶的编码基因和所述酪氨酸酚裂解酶的编码基因导入受体菌，得到表达所述乙醇酸氧化酶和所述酪氨酸酚裂解酶的重组菌。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的重组菌，其特征在于：所述重组菌的受体菌为下述M1)-M3)中任一项所述的微生物：

下述任一种微生物：

M1)真菌；

M2)酵母；

M3)毕赤酵母。

6.根据权利要求4或5所述的重组菌，其特征在于：

所述乙醇酸氧化酶的编码基因选自下述g1)-g3)中的任一项：

g1)、编码链的核苷酸序列是SEQ ID No.1第1-1110位的DNA分子；

g2)、编码链的核苷酸序列是SEQ ID No.1的DNA分子；

g3)、与g1)或g2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码具有乙醇酸氧化酶功能的蛋白质的DNA分子；

所述酪氨酸酚裂解酶的编码基因选自下述g4)-g6)中的任一项：

g4)、编码链的核苷酸序列是SEQ ID No.2第1141-2508位或SEQ ID No.1第1141-2511位或SEQ ID No.3第1141-2523位所示的DNA分子；

g5)、编码链的核苷酸序列是SEQ ID No.2或SEQ ID No.1或SEQ ID No.3的DNA分子；

g6)、与g4)或g5)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码具有酪氨酸酚裂解酶功能的蛋白质的DNA分子。

7.权利要求4-6中任一项所述重组菌的构建方法。

8.权利要求1-6中任一项所述的重组菌在制备L-酪氨酸中的应用。

9.制备L-酪氨酸的方法，其特征在于：所述方法包括使用权利要求1-6中任一项所述的重组菌和L-乳酸和苯酚制备L-酪氨酸。

10.与权利要求1-6中任一项所述重组菌相关的生物材料，其特征在于：所述生物材料包括下述B1)或B2)：

B1)表达权利要求2或3中所述的乙醇酸氧化酶和酪氨酸酚裂解酶的表达盒；

B2)表达权利要求2或3中所述的乙醇酸氧化酶和酪氨酸酚裂解酶的重组表达载体或含有B1)所述表达盒的重组表达载体。