[发明专利]一种仅具有RNA靶切割活性的原核Argonaute蛋白质在RNA编辑中的应用有效
| 申请号： | 202210794665.9 | 申请日： | 2022-07-07 |
| 公开（公告）号： | CN115927251B | 公开（公告）日： | 2023-10-20 |
| 发明（设计）人： | 马立新;刘琦;刘洋;王飞;陈晚苹 | 申请（专利权）人： | 湖北大学 |
| 主分类号： | C12N9/22 | 分类号： | C12N9/22;C12N15/10 |
| 代理公司： | 武汉智嘉联合知识产权代理事务所(普通合伙) 42231 | 代理人： | 姜婷 |
| 地址： | 430062 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 具有 rna 切割 活性 argonaute 蛋白质 编辑 中的 应用 | ||
1.一种原核Argonaute蛋白质在体内或体外RNA编辑中的应用，其特征在于，所述Argonaute蛋白质仅具有RNA靶切割活性，所述Argonaute蛋白质的氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示；或者为在SEQ ID NO:1所示序列的第181-306、或/和386-548、或/和549-782位点中存在一个或多个氨基酸残基的替换和/或删除，且具有与SEQ ID NO:1所示蛋白质相同功能的蛋白质。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述RNA靶为没有高级结构的RNA，或为有高级结构的RNA。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，编码SEQ ID NO:1所示蛋白质的基因的序列如SEQ ID NO:2所示。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，在反应体系中，加入Argonaute蛋白质、gDNA和靶RNA进行反应。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述gDNA为5’末端磷酸化的ssDNA或5’末端羟基化的ssDNA。
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述gDNA的长度为13至35个核苷酸。
7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述反应的温度为25～65℃。
8.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述反应体系中包含Mn2+、Mg2+、Ni2+中的至少一种。
9.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述反应体系中包含NaCl且其浓度为50～1250mM。
10.一种RNA编辑试剂盒，其特征在于，包含权利要求1所述的Argonaute蛋白质。
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