[发明专利]三个从酒茱萸中分离得到具有防治心衰作用的化合物的制备方法及其应用

权利要求书

1.三个从酒茱萸中分离得到具有防治心衰作用的化合物，分别是compound 1：(R)-5-((2′-hydroxy-4′-methoxy-4′-oxobutanoyl)oxy)methyl-2-furancarboxylic acid，分子式为C₁₁H₁₂O₈，不饱和度为6；compound 2：(R)-5-((3′-hydroxy-4′-methoxy-4′-oxobutanoyl)oxy)methyl-2-furan carboxylic acid，分子式为C₁₁H₁₂O₈，不饱和度为6；compound 3：5-((3′-carboxypropanoyl)oxy)methyl-2-furancarboxylic acid，分子式为C₁₀H₁₀O₇，不饱和度为6；分子结构式分别为：

2.权利要求1所述的三个从酒茱萸中分离得到具有防治心衰作用的化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)取干燥的酒萸肉10Kg，每次加6～10倍重量体积的水或体积浓度30％乙醇水溶液，100℃加热回流提取2～5次，每次提取1～3h，合并提取液，减压浓缩，得到室温下相对密度1.18-1.2g/mL的浸膏；

(2)浸膏加水2.0～4.0L分散成悬浮液，每次用2～4L乙酸乙酯萃取3～6次，每次萃取待静置分层完全，进行下一次萃取，合并萃取液，减压浓缩，得到室温下相对密度1.28-1.3g/mL的乙酸乙酯浸膏；

(3)乙酸乙酯浸膏经200～300目硅胶柱色谱，直径d＝6～10cm，柱高H＝16～20cm，用体积比100:0、100:2、100:10二氯甲烷-甲醇进行梯度洗脱，每个比例洗脱3～6个柱体积，收集100:10洗脱液，减压浓缩回收洗脱液，采用薄层色谱法检识，得馏分Fr.B；

(4)馏分Fr.B经Toyopearl HW-40柱层析，直径d＝6～8cm，柱高H＝12～15cm，用体积比10:90、20:80、30:70甲醇-水进行梯度洗脱，每个比例洗脱5～10个柱体积，收集30:70洗脱液，减压浓缩回收溶剂，得到馏分Fr.B3；

(5)馏分Fr.B3经Sephadex LH-20柱层析，直径r＝1.5～2.5cm，柱高H＝120～150cm，用甲醇进行洗脱，流速0.5～1.0mL/min，薄层色谱法检识，收集相同流分，得到馏分Fr.B3-4；

(6)采用半制备HPLC，使用纳谱分析半制备柱，色谱条件18％～20％CH₃CN/H₂O，流速3～3.5mL/min，对馏分Fr.B3-4进行制备纯化，收集保留时间t_R＝24～49min，得化合物1，收集保留时间t_R＝26～52min，得化合物2，收集保留时间t_R＝27～55min，得化合物3。