[发明专利]一种液基细胞制片的方法

权利要求书

1.一种液基细胞制片的方法，包括以下步骤：

S1：将液基样品放入到培养皿中，孵育后，切换至生理盐水体系，然后向培养皿中加入苯甲酸甲酯和甘油三苯酸甲酯组成的混合物，离心，然后用生理盐水冲洗掉上层的红细胞、白细胞和粘液；再然后用吸走表层液膜，底层即为处理后的液基样品；

S2：向步骤S1中处理后的液基样品中加入细胞保存处理液，充分振荡，对细胞进行定型，得到定型处理后的液基样品；

S3：将步骤S2中定型处理后的液基样品置于沉降仓中进行沉降，沉降后，去除上清液，然后进行巴氏染色，得到染色后的液基样品；

S4：将步骤S3中染色后的液基样品进入离心机的制片仓，通过离心作用，在病理玻片上形成均匀的细胞层，封片后，即可用于检测。

2.根据权利要求1所述的液基细胞制片的方法，其特征在于，所述步骤S1中，苯甲酸甲酯和甘油三苯酸甲酯的质量比为(0.47~0.59):(0.41~0.53)；混合物的密度在1.14~1.17g/cm3；混合物配置时，是将甘油三苯酸甲酯加入到苯甲酸甲酯中，加热至70~80℃，使甘油三苯酸甲酯充分溶解，得到均匀的混合物。

3.根据权利要求1所述的液基细胞制片的方法，其特征在于，所述步骤S1中，苯甲酸甲酯和甘油三苯酸甲酯组成的混合物加入量为液基样品生理盐水体系体积的0.2~0.3倍。

4.根据权利要求1所述的液基细胞制片的方法，其特征在于，所述步骤S1中，离心的转速为1000~1200r/min；生理盐水冲洗时间为4~5min。

5.根据权利要求1所述的液基细胞制片的方法，其特征在于，所述步骤S2中，每100mL细胞保存处理液，有以下组分组成：十二水磷酸氢二钠：2.5~3.1g；二水磷酸二氢钠：0.25~0.35g；乙醇20~30mL；甲醛 1~5mL；氯化钠0.1~1g；二硫苏糖醇0.2~0.4g；谷氨酰胺0.03~0.05g；叶酸0.1~0.2g；加蒸馏水补充至100mL。

6.根据权利要求5所述的液基细胞制片的方法，其特征在于，所述步骤S2中，处理后的液基样品和细胞保存处理液的体积比为1:2~4。

7.根据权利要求1所述的液基细胞制片的方法，其特征在于，所述步骤S3中，巴氏染色的具体步骤为：向沉降后的液基样本中加入95%无水乙醇固定15~20min，蒸馏水清洗4~5次，接着置于苏木素染液中3~5min，清水冲洗2~3次，进行蓝化，接着95%的乙醇进行漂洗，置于橙黄染液中1~10s,接着95%的乙醇进行漂洗，再接着100%的乙醇漂洗，然后置于EA50染料中3~5min，接着95%的乙醇进行漂洗2次,100%的乙醇漂洗，置于无水乙醇中2~3min，接着置于二甲苯中2min。

8.根据权利要求1所述的液基细胞制片的方法，其特征在于，所述步骤S4中，离心转速为700~800r/min。