[发明专利]一种β受体激动剂的快检试纸条及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种β受体激动剂快检试纸条，其特征在于，包括样品垫、结合垫、NC膜、吸水纸和胶板，其中，结合垫包括结合垫基体和彩色微球与β受体激动剂偶联物；

所述结合垫基体由下步骤制备：

a、浸泡：将结合垫置于结合垫浸泡液中浸泡，取出浸泡好的结合垫烘干；

b、彩色微球活化：取彩色微球，超声，取超声好的彩色微球200μL加MES溶液混合均匀，离心、弃上清液，重复2次后再加入MES溶液混合均匀、超声；

用上述MES溶液配制浓度5～20mol/L的NHS溶液，取NHS溶液加入超声好的彩色微球中，再用纯水配制EDC，EDC溶液的浓度为10～20mol/L，取EDC溶液1～5μL加入到上述彩色微球中，用锡箔纸包裹避光摇床反应5～30min，为活化后的彩色微球；

c、彩色微球和β受体激动剂抗体偶联物的制备：取1μg/μL的β受体激动剂抗体1～5μL加入活化后的彩色微球中混合均匀，避光摇床反应0.5～3h，加入5～15μL的0.05～3mol/L的乙醇胺溶液混合均匀，避光摇床反应后离心，弃上清夜，用300～1000μL的微球稀释液混合均匀，超声5min，避光摇床反应1h，离心,弃上清液，用100～300μL的微球稀释液混合均匀、超声，形成均匀的β受体激动剂抗体-彩色微球溶液，将溶液置于2～8℃下保存；

d、喷金和烘干：取出步骤c制备的溶液，加入喷金稀释液稀释，稀释后用碳酸钾调节pH为8～9.5，在步骤a制备的结合垫上进行喷金，将喷金后的结合垫37～48℃烘烤1～1.5h；

所述结合垫浸泡液为pH＝7～7.5的0.03～0.05mol/L的Tris-HCL缓冲溶液，其中包含质量体积比为3～5％的海藻糖、0.3～0.5％BSA、0.05～0.1％吐温；

其中，所述β受体激动剂抗体选自：异丙喘宁抗体、氯丙那林抗体、西马特罗抗体、特布他林抗体、妥布特罗抗体、西布特罗抗体、沙丁胺醇抗体、齐帕特罗抗体、克伦特罗抗体、莱克多巴胺抗体、非诺特罗抗体、马布特罗抗体、溴代克伦特罗抗体、马贲特罗抗体、苯乙醇胺A抗体、溴布特罗中的一种或多种；

所述微球稀释液为：0.01～0.02mol/LPBS和0.5～1.2％BSA；

所述步骤c中，微球稀释液添加量为300～1000μL；

所述喷金使用的稀释液组成为：0.02％硼酸、0.2％PEG20000、0.02％防腐剂、10％海藻糖、0.25％吐温和1％BSA；

所述喷金的量为6～9.9μL/cm，优选为6μL/cm。

2.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述β受体激动剂抗体选自莱克多巴胺抗体、沙丁胺醇抗体、盐酸克伦特罗抗体。

3.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述β受体激动剂抗体量为2～5μL/mL。

4.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述彩色微球的粒径为100～300nm，优选为300nm。

5.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述的样品垫为玻璃纤维材质、聚酯纤维膜；

优选为玻璃纤维膜；

所述玻璃纤维膜的厚度为0.2～0.6mm，优选为0.3～0.45mm；

所述玻璃纤维膜的爬速5～70mm/60s；

优选的，所述玻璃纤维膜的爬速5～50mm/60s；

优选的，所述的结合垫材质为玻璃纤维，吸水量为450±50g/m²；

所述的NC膜选自宽度为20～25mm，爬速为100～125s/4cm的NC膜；

所述的吸水纸选自爬速40～180s/mm、厚度0.87～1.13mm的吸水纸。

6.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述NC膜上含有T线和C线，所述T线包含β受体激动剂抗原，所述C线为包含IgG；

所述β受体激动剂抗原为莱克多巴胺、沙丁胺醇或盐酸克伦特罗。