[发明专利]一种β受体激动剂的快检试纸条及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种β受体激动剂快检试纸条及其制备方法和应用，本发明所述试纸条包括样品垫、结合垫、NC膜、吸水纸和胶板，其中，结合垫包括结合垫和彩色微球与β受体激动剂偶联物，本发明的试纸条具有体积小、质量轻、便于携带、分析速度快、操作步骤简单等优点，打破了传统检测方法的局限性。对样本量庞大的现场快速检测提供了有力的技术支持。同时也给市场监督管理人员对于现场排查和检测带来了极大的便利。

技术领域

本发明涉及一种定量鉴定技术领域，尤其是涉及一种β受体激动剂的快检试纸条及其制备方法和应用。

背景技术

“瘦肉精”属于β受体激动剂，对人的危害很大，主要表现为在：急性中毒时出现心悸，面颈、四肢肌肉颤动，手指震颤，足有沉感甚至不能站立，头痛、头晕、恶心、呕吐、乏力，脸部潮红，皮肤过敏性紫色丘疹。

目前食品中β受体激动剂检测的主要方法有：液质联用、质谱法、气质联用等仪器方法，仪器法虽然可以用于食品中瘦肉精含量的测定，但由于所使用的仪器设备体积过大，设备维护费用高、检测所需时间长，检测操作步骤繁琐，对于样本量大的的现场快速检测而言，这些方法就难以实现。

免疫层析法因具有操作简便、结果清晰等优点，已成为临床快速诊断领域的热点。现有的瘦肉精试纸检测产品主要是在胶体金免疫层析技术的基础上制成的胶体金免疫层析试纸等系列产品，如专利文献CN203786122U公开了一种测量精度高的瘦肉精检测试纸卡，该试纸卡的金标物结合垫上包被有抗盐酸克伦特罗偶联物、抗莱克多巴胺偶联物和抗沙丁胺醇偶联物金标抗体的混合物，现有技术(陈艺宏.β受体激动剂金标检测卡的技术研究[D].福州大学,2017.)公开了β受体激动剂金标检测卡的制备条件及样品的前处理条件进行了优化,并披露了β受体激动剂金标检测卡所需抗原抗体的制备，现有技术(姜艳彬,孙冠如,王海,等.盐酸克伦特罗胶体金快速检测试纸条的研制[C],2011)公开以胶体金标记盐酸克伦特罗单克隆抗体竞争性膜层析技术制成了猪尿液中盐酸克伦特罗残留检测的快速检测试纸条。

然而，目前胶体金免疫层析试纸条主要存在以下缺陷：1、胶体金显色单一，通常只能显示单一的红色，2、胶体金粒径不易控制，很难根据试纸的需要调整粒径的大小；3、胶体金标记过程中需要用到强还原剂，对人体健康有一定影响；4、胶体金表面没有生物活性基团，与抗体的结合完全靠静电作用，稳定性较差；5、胶体金粒径较h是圆形，粒径较大时为椭圆形，形状不稳定。

综上所述，亟需开发一种成本低廉、操作简便、结果直观准确、灵敏度高、稳定性好的免疫层析检测方法。

发明内容

为了克服上述现有技术提到的问题，本发明目的在于提供一种β受体激动剂快检试纸条及其检测方法，本发明提供的试纸条成本低廉、操作简便、结果直观准确、灵敏度高、稳定性好。

为了实现上述目的，本发明提供以下技术方案：

本发明第一方面提供了一种β受体激动剂快检试纸条，包括样品垫、结合垫、NC膜、吸水纸和胶板，其中，结合垫包括结合垫和彩色微球与β受体激动剂偶联物；

所述结合垫由下步骤制备：

a、浸泡：将结合垫置于结合垫浸泡液中浸泡，取出浸泡好的结合垫烘干；

b、彩色微球活化：取彩色微球，超声，取超声好的彩色微球200μL加MES溶液混合均匀，离心、弃上清液，重复2次后再加入MES溶液混合均匀、超声；

用上述MES溶液配制浓度5～20mol/L的NHS溶液，取NHS溶液加入超声好的彩色微球中，再用纯水配制EDC，EDC溶液的浓度为10～20mol/L，取EDC溶液1～5μL加入到上述彩色微球中，用锡箔纸包裹避光摇床反应5～30min，为活化后的彩色微球；