[发明专利]天冬氨酸激酶突变体及其在生产L-高丝氨酸中的应用

权利要求书

1.一种来源于酿酒酵母的天冬氨酸激酶LysC突变体，其特征在于，相对于SEQ ID No.2所示氨基酸序列而言，仅第299位由缬氨酸V突变为丙氨酸A，或者第317位由天冬酰胺N突变为丝氨酸S，或者第485位由天冬酰胺N突变为丝氨酸S中的一个位点突变；仅存在第107位由谷氨酰胺Q突变为精氨酸R和第317位由天冬酰胺N突变为丝氨酸S的组合突变；仅存在第114位由苏氨酸T突变为丝氨酸S和第510位由谷氨酰胺Q突变为精氨酸R的组合突变；仅存在第155位由苏氨酸T突变为丙氨酸A和第390位由赖氨酸K突变为谷氨酸E的组合突变。

2.如权利要求1所述天冬氨酸激酶LysC突变体的编码基因。

3.如权利要求2所述的编码基因，其特征在于，其核苷酸序列是在SEQ ID No .1所示核苷酸酸序列的基础进行突变获得的。

4.含有如权利要求2或3所述编码基因的表达载体。

5.含有如权利要求2或3所述编码基因的宿主细胞，优选是大肠杆菌、谷氨酸棒杆菌或酿酒酵母，更优选为大肠杆菌、谷氨酸棒杆菌或酿酒酵母。

6.如权利要求1所述的天冬氨酸激酶突变体或其编码基因在制备L-高丝氨酸或其衍生物中的应用，所述衍生物选自O-乙酰高丝氨酸或甲硫氨酸。

7.一种制备L-高丝氨酸或其衍生物，或赖氨酸的方法，其特征在于，将含有如权利要求2或3所述编码基因的重组微生物发酵生产所述L-高丝氨酸或其衍生物，所述微生物以具有L-高丝氨酸生产能力的底盘工程菌作为出发菌；所述衍生物是苏氨酸、亮氨酸、异亮氨酸。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述微生物是具有L-高丝氨酸生产能力的大肠杆菌、谷氨酸棒杆菌或酿酒酵母，更优选为具有L-高丝氨酸生产能力的大肠杆菌、谷氨酸棒杆菌或酿酒酵母。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述大肠杆菌中敲除了自身高丝氨酸降解途径基因thrB，同时过表达天冬氨酸激酶/高丝氨酸脱氢酶基因thrA。

10.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述谷氨酸棒杆菌中敲除了自身高丝氨酸降解途径基因thrB，同时过表达高丝氨酸脱氢酶基因hom。