[发明专利]用于检测小米成分的特异性引物、探针、试剂盒及方法在审
申请号: | 202210811084.1 | 申请日: | 2022-07-11 |
公开(公告)号: | CN116064886A | 公开(公告)日: | 2023-05-05 |
发明(设计)人: | 陈颖;邓婷婷;黄文胜;张九凯;邢冉冉 | 申请(专利权)人: | 中国检验检疫科学研究院 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 北京天盾知识产权代理有限公司 11421 | 代理人: | 丁敬博 |
地址: | 100176 北京市大*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 小米 成分 特异性 引物 探针 试剂盒 方法 | ||
1.一种用于检测小米成分的特异性引物,其特征在于,所述特异性引物的上游引物序列如SEQ ID NO.1所示,下游引物序列如SEQ ID NO.2所示。
2.一种用于检测小米成分的探针,其特征在于,所述探针的序列如SEQ ID NO.3所示。
3.根据权利要求2所述的探针,其特征在于,所述探针的3′端标记有荧光淬灭基团,5′端标记有荧光报告基团。
4.根据权利要求3所述的探针,其特征在于,所述荧光淬灭基团选自TAMRA、BHQ1、BHQ2或MGB;所述荧光报告基团选自FAM、VIC、JOE或HEX。
5.一种用于检测小米成分的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的特异性引物和任选的权利要求2-4任一项所述的探针。
6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括PCR反应缓冲液、dNTPs和TaqDNA聚合酶。
7.权利要求1所述的特异性引物、权利要求2-4任一项所述的探针或权利要求5-6任一项所述的试剂盒在检测样品中小米成分的应用。
8.权利要求1所述的特异性引物、权利要求2-4任一项所述的探针或权利要求5-6任一项所述的试剂盒在制备用于检测样品中小米成分的试剂中的应用。
9.一种检测小米成分的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)提取样品中的核酸,得DNA模板;
(2)使用权利要求1所述的特异性引物对步骤(1)获得的DNA模板进行PCR扩增,得到扩增产物;
(3)测定步骤(2)中所得的PCR扩增产物的大小,若所述PCR扩增产物中含有113bp的DNA片段,则所述待测样品中存在小米成分;反之,则所述待测样品中不存在小米成分;所述113bp的DNA片段序列如SEQ ID NO.4所示。
10.一种检测小米成分的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)提取样品中的核酸,得DNA模板;
(2)使用权利要求1所述的特异性引物和权利要求2-4任一项所述的探针对步骤(1)提取的DNA模板进行实时荧光PCR扩增;
(3)收集荧光信号,得出检测结果。
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