[发明专利]一种伊文思蓝修饰的靶向EpCAM的核酸适配体及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种伊文思蓝修饰的靶向EpCAM的核酸适配体及其制备方法和应用，由SYL3C、双功能螯合剂和截短的伊文思蓝连接构成伊文思蓝修饰的核酸适配体EB‑SYL3C，以EB‑SYL3C作为配体可以延长SYL3C的血液循环半衰期，以及提高肿瘤摄取水平和肿瘤滞留时间，从而应用于EpCAM靶向的核素诊断或治疗中。

技术领域

本发明属于核医学与分子影像学领域，涉及靶向EpCAM的放射性标记配合物，具体涉及以SYL3C为靶向配体，并通过伊文思蓝修饰获得的在放射性核素诊断和治疗中具有优良动力学性质的长循环半衰期分子探针。

背景技术

上皮细胞黏附分子(Epithelial cell adhesion molecule，EpCAM)是一种单次跨膜糖蛋白，它参与Wnt信号转导通路，与细胞黏附、迁移、增殖、分化等密切相关。报道显示，EpCAM与肿瘤发生、发展的恶性进程有关，是对肿瘤进行早期诊断和治疗的重要靶标。

核酸适配体是基于核苷酸结构的一类新型配体，其亲和力、特异性与抗体相当，有“化学抗体”之称。与抗体相比，核酸适配体还具有如下显著优势：可在体外筛选；靶分子范围广；分子量较低，没有免疫原性和毒性；可通过化学合成制备、改造与标记；能可逆变性与复性等。优良的生物、化学性质使利用核酸适配体发展EpCAM靶向探针成为新的趋势。但是由于核酸适配体在体内易遭受核酸酶的降解，从而导致了核酸适配体的体内稳定性差、血液循环半衰期短、体内代谢动力学不佳等问题。

伊文思蓝(Evans blue，EB)是一种常用的偶氮染料制剂，它可与血浆白蛋白结合形成伊文思蓝-白蛋白复合体，因而常被用来修饰药物，并通过在体内搭载白蛋白，从而延长药物的体内循环时间。除此之外，伊文思蓝-白蛋白复合体还具有类似纳米粒子的增强渗透滞留效应(Enhanced permeability and retention effect，EPR效应)，可以被动富集于肿瘤部位。中国专利CN113366064A中指出，截短的伊文思蓝衍生物已应用于放射配体治疗，但伊文思蓝的截断导致该衍生物对白蛋白的结合亲和力及荧光发射降低。为此CN113366064A提出的伊文思蓝衍生物中从数量角度增强了伊文思蓝的修饰，但该伊文思蓝衍生物可连接的配体类型并不包括核酸适配体，并且由于其采用了一分子双功能螯合剂直接与两分子截短的伊文思蓝连接的结构，从而难以再进行放射性核素的标记。

SYL3C是一个包含有48个核苷酸的DNA核酸适配体，其对EpCAM的亲和力可达纳摩尔级别。中国专利CN112843261A中将SYL3C与双功能螯合剂连接，以便标记放射性核素，但前期的实验结果显示，经⁶⁸Ga等放射性核素标记的SYL3C，在进入小鼠体内10min后即全部经由肾脏排泄，且SYL3C的肿瘤摄取水平较低，可见通过修饰来解决SYL3C在体内易降解的问题仍属于技术难题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种伊文思蓝修饰的靶向EpCAM的核酸适配体及其制备方法和应用，解决SYL3C在用于EpCAM阳性肿瘤的核素诊断或治疗中体内稳定性差、代谢迅速及肿瘤摄取水平低的问题。

为达到上述目的，本发明采用了以下技术方案：

一种伊文思蓝修饰的核酸适配体(记作“EB-SYL3C”)，该核酸适配体EB-SYL3C为具有如式Ⅰ所示结构的化合物或该化合物的互变异构体、立体异构体、在药学上可接受的盐中的任意一种：