[发明专利]一种自组装肽及其制备方法和应用在审
申请号: | 202210832829.2 | 申请日: | 2022-07-14 |
公开(公告)号: | CN116333042A | 公开(公告)日: | 2023-06-27 |
发明(设计)人: | 管骁;宋洪东;李森;黄凯;靳祖珑 | 申请(专利权)人: | 上海理工大学 |
主分类号: | C07K7/06 | 分类号: | C07K7/06;C12P21/06;C07K1/16;A23L29/00 |
代理公司: | 北京圣州专利代理事务所(普通合伙) 11818 | 代理人: | 刘岩 |
地址: | 200093 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 组装 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种自组装肽,其特征在于:自组装肽为如SEQ ID NO.1所示的序列。
2.一种自组装肽的制备方法,其特征在于,步骤如下:
S1、藜麦蛋白的制备
将粉碎脱脂的藜麦粉分散于蒸馏水中进行提取,结束后离心进行固液分离取上清液,调节pH,在4℃下静置使其析出蛋白沉淀;将沉淀蛋白加入去离子水分散后用NaOH溶液调节pH至中性,离心分离后取上清液,将上清液真空冷冻干燥得到藜麦蛋白;
S2、采用α-胰凝乳蛋白酶对藜麦蛋白进行酶解;
S3、藜麦蛋白肽纳米载体的制备和分离
将藜麦蛋白肽分散于去离子,使用超声波清洗仪辅助制备肽纳米载体,采用葡聚糖凝胶G-75玻璃色谱柱对藜麦蛋白肽纳米载体进行分离,以去离子水为流动相,在214nm处测定吸光度值,检测洗脱过程中各个洗脱峰的粒径,收集粒径为20-200nm的载体组分,即为目标自组装肽。
3.根据权利要求2所述的一种自组装肽的制备方法,其特征在于,步骤如下:
S1、藜麦蛋白的制备
将粉碎脱脂的藜麦粉分散于蒸馏水中进行提取,结束后离心进行固液分离取上清液,将pH调节至4.5,在4℃下静置使其析出蛋白沉淀;将沉淀蛋白以1:2(v/v)比例加入去离子水分散后用NaOH溶液调节pH至中性,离心分离后取上清液,将上清液真空冷冻干燥得到藜麦蛋白;
S2、藜麦蛋白的酶解
采用α-胰凝乳蛋白酶对藜麦蛋白进行酶解,pH为7-9,温度30-60℃,酶与底物比例为1:25-100,酶解时间为0.5-4h;
S3、藜麦蛋白肽纳米载体的制备和分离
将藜麦蛋白肽以0.1-5mg/mL的浓度分散于去离子,使用超声波清洗仪辅助制备肽纳米载体,超声功率为100-500W,超声时间5-25min;
采用葡聚糖凝胶G-75玻璃色谱柱对藜麦蛋白肽纳米载体进行分离,以去离子水为流动相,在214nm处测定吸光度值,检测洗脱过程中各个洗脱峰的粒径,收集粒径为20-200nm的载体组分,即为目标自组装肽。
4.一种自组装肽在包埋增溶食品功能因子以及保护食品功能因子免受胃肠环境破坏中的应用。
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