[发明专利]一种基于SH2超亲体的融合蛋白及应用在审
| 申请号： | 202210834432.7 | 申请日： | 2022-07-14 |
| 公开（公告）号： | CN115991789A | 公开（公告）日： | 2023-04-21 |
| 发明（设计）人： | 曹轩;刘安冬;郭乐之;徐惠;杜宏源 | 申请（专利权）人： | 华中科技大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;C12P21/02;A61K38/17;A61K47/64;A61P35/02 |
| 代理公司： | 华中科技大学专利中心 42201 | 代理人： | 孙杨柳 |
| 地址： | 430074 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 sh2 超亲体 融合 蛋白 应用 | ||
1.一种基于SH2超亲体的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白含有慢性粒细胞白血病细胞特异性穿膜肽，还含有SH2超亲体，所述慢性粒细胞白血病细胞特异性穿膜肽与所述SH2超亲体连接。
2.如权利要求1所述的基于SH2超亲体的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:1所示。
3.一种表达载体的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)扩增得到表达SH2超亲体的基因片段；
(2)将步骤(1)得到的基因片段构建到表达载体上，得到含有SH2超亲体的基因片段的重组质粒；
(3)以步骤(2)得到的重组质粒为模板，运用SEQ ID NO:2所示的正向引物和SEQ IDNO:3所示的反向引物进行PCR扩增，得到含有SH2超亲体的基因片段和慢性粒细胞白血病细胞特异性穿膜肽的基因片段的表达载体。
4.如权利要求3所述的表达载体的构建方法，其特征在于，步骤(2)所述表达载体为pET-28a、pGEX-4T3、pETM30或pETM11。
5.如权利要求3或4所述方法构建得到的表达载体。
6.一种基于SH2超亲体的融合蛋白的表达和纯化方法，其特征在于，将权利要求5所述的表达载体转化到感受态细胞，并诱导目标蛋白表达，利用琼脂糖凝胶磁珠和咪唑洗脱液进行目标蛋白纯化。
7.如权利要求1或2所述的基于SH2超亲体的融合蛋白的应用，其特征在于，用于制备靶向治疗慢性粒细胞白血病的药物。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述融合蛋白能特异性与慢性粒细胞白血病细胞中的磷酸化酪氨酸结合，从而抑制慢性粒细胞白血病细胞的增殖。
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