[发明专利]一种重组酵母菌株及其在生物转化人参二醇型皂苷中的应用在审
| 申请号： | 202210841209.5 | 申请日： | 2022-07-18 |
| 公开（公告）号： | CN116004406A | 公开（公告）日： | 2023-04-25 |
| 发明（设计）人： | 余晓斌;杨文华;顾秋亚 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/81;C12N9/42;C12N15/56;C12P33/20;C12R1/84 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 赵巧娜 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 重组 酵母 菌株 及其 生物转化 人参 二醇型 皂苷 中的 应用 | ||
1.一种重组毕赤酵母，其特征在于，所述重组毕赤酵母过表达了塔宾曲霉(Aspergillus tubingensis)来源的β-葡萄糖苷酶，所述β-葡萄糖苷酶的氨基酸序列如SEQID NO.1所示或SEQ ID NO.3所示。
2.如权利要求1所述的重组毕赤酵母，其特征在于，编码所述β-葡萄糖苷酶的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示或如SEQ ID NO.4所示。
3.如权利要求1或2所述的重组毕赤酵母，其特征在于，所述重组毕赤酵母以pPIC9K质粒为表达载体。
4.如权利要求3所述的重组毕赤酵母，其特征在于，所述重组毕赤酵母以毕赤酵母GS115为表达宿主。
5.权利要求1～4任一所述的重组毕赤酵母或采用所述重组毕赤酵母发酵制备得到的β-葡萄糖苷酶酶液在水解人参皂苷中的应用，其特征在于，所述人参皂苷包括但不限于人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷F2。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，编码所述β-葡萄糖苷酶的核苷酸序列如SEQID NO.2所示或如SEQ ID NO.4所示。
7.一种制备人参皂苷Rd的方法，其特征在于，所述方法为，将权利要求1～4任一所述的重组毕赤酵母或采用所述重组毕赤酵母发酵制备的β-葡萄糖苷酶添加至含有人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb2和/或人参皂苷Rb3的反应体系中进行反应，制备得到人参皂苷Rd。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，编码所述β-葡萄糖苷酶的核苷酸序列如SEQID NO.2所示。
9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述反应的条件为：pH 5.5～6.0，45～55℃反应4～6h。
10.一种制备人参皂苷CK的方法，其特征在于，所述方法为，将权利要求1～4任一所述的表达氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示β-葡萄糖苷酶的重组毕赤酵母，或将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的β-葡萄糖苷酶添加至反应体系中进行反应，制备得到人参皂苷CK；所述反应体系中含有人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3和/或人参皂苷F2。
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