[发明专利]一种IPSC培养体系及IPSC残留检测的方法

权利要求书

1.一种IPSC培养体系，其特征在于，包括基础培养基，所述基础培养基中添加胰岛素、抗坏血酸2-磷酸盐、转铁蛋白、亚硒酸钠、NaHCO₃、FGFb、TGFβ和Harmine。

2.根据权利要求1所述的IPSC培养体系，其特征在于，所述基础培养基为含有HEPES的DMEM/F12。

3.根据权利要求1或2所述的IPSC培养体系，其特征在于，所述基础培养基中添加各物质的含量为：18-20mg/L胰岛素、63-65mg/L抗坏血酸2-磷酸盐、9-11mg/L转铁蛋白、13-15μg/L亚硒酸钠、2430-2440mg/LNaHCO3、2-100ng/mL FGFb、1-10ng/mL TGFβ和1-10uMHarmine。

4.根据权利要求3所述的IPSC培养体系，其特征在于，所述基础培养基中添加各物质的含量为：19.4mg/L胰岛素、64mg/L抗坏血酸2-磷酸盐、10.7mg/L转铁蛋白、14μg/L亚硒酸钠、2438mg/L NaHCO3、20ng/mL FGFb、2ng/mL TGFβ和2uM Harmine。

5.一种IPSC残留检测试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1至4任一项所述的IPSC培养体系。

6.一种IPSC残留检测的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)使用如权利要求1至4任一项所述的IPSC培养体系，扩大培养IPSC来源的功能细胞；(2)对扩大培养后的细胞，检测细胞的干细胞标志基因，判断是否存在未分化IPSC残留。

7.根据权利要求6所述一种IPSC残留检测的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述IPSC来源的功能细胞为ARPE-19细胞、内皮细胞，肝细胞，胰岛细胞、间充质干细胞或NK细胞。

8.根据权利要求6所述一种IPSC残留检测的方法，其特征在于，步骤(2)中，使用2-3个干细胞标志基因进行检测，所述干细胞标志基因选自ESRG、Lin28A、Alcam、Arid1b、Ars2、Ash2l、Axin2、Bmi1、Brix、Cbx1、Cbx5、Ccna1、Ccnd1、Ccnd2、Ccne1、Ccnf、Cd24、Cd44、Cd9、Cdh3、Cdk2、Cdk4、Cdk6、Cdkn1b、Cdyl、Cldn6、Cnot1、Cnot2、Cnot3、Cops2、Cops4、Cpsf3、rabp1、Dazap1、Dnmt3b、Dppa2、Dppa3、Dppa4、Dppa5、Dpy30、E2f1、Eed、Ehmt2、Eif2b1、Eif2b2、Eif2b3、Eif2s2、Epcam、Eras、Esrrb、Ewsr1、Ezh1、Ezh2、Fbxo15、Fgf13、Fgf4、Flt3、Foxd3、Foxh1、Fry、Fut4、SSEA1、Gabrb3、Gal、Gbx2、Gdf3、Gja1、Gli1、Gli2、Gli3、Glis1、Gnl3、Grb7、H2afz、Has2、Hcfc1、Herc5、Hesx1、Hira、Hmga1、Hspa4、Hspb1、Id1、Ing5、Itga6、Jarid2、Kat2a、Kat5、Kat6a、Kdm1a、Kdm3a、Kdm4a、Kdm4c、Kdm5b、Kit、Kitlg、Klf12、Klf2、Klf4、Klf5、L1td1、Lefty1、Lefty2、Lin28b、Ly6e、Mapk1、Max、Mcm2、Mcrs1、Med1、Med10、Med12、Med13、Med13l、Med14、Med17、Med19、Med24、Med28、Metap2、Mga、Mll、Mll2、Mll3、Mll5、Msi1、Mt1a、Mt2a、Mthfd1、Mybl2、Myc、Mycn、Nacc1、Nanog、Nanos1、Ncam、Ncoa2、Ncoa3、Nfrkb、Nodal、Npr1、Nr0b1、Nr6a1、Nts、Otx1、Otx2、Paf1、Pcgf6、Pcid2、Pcna、Phc1、Phc2、Phc3、Pim2、Podxl、Pou5f1、Ppp1r3d、Prdm14、Prdm16、Prdm5、Prmt6、Prom1、Ptprz1、Pum1、Pum2、Rad21、Rb1、Rbbp4、Rbbp5、Rbbp7、Rbbp9、Rbl2、Rbx1、Rest、Rif1、Ring1、Rnf2、Rtf1、Sall1、Sall4Sema4a、Setdb1、Setdb2、Sf3a1、Sf3a3、Sfrp2、Sirt2、Skil、Smad1、Smad2、Smad3、Smarca4、Smarca5、Smarcd1、Smarcb1、Smarcc1、Smarcd1、Smc1a、Smo、Sox2、Sox3、Sp1、Spp1、Stag1、Stat3、Sub1、Suv39h2、Suz12、Taf2、Taf7、Tcf3、Tcf7l1、Tcl1a、Tdgf1、Terf1、Tert、Tgif、Thap11、Thy1、Tle1、Tnfrsf8、Top2a、Trim16、Trim24、Trim28、Utf1、Wdr18、Wdr5、Wnt2b、Wnt8a、Xpo7、Yy1、Zfhx3、Zfp41、Zfp42、Zfx、Zic2、Zic3、Zic5、Znf143、Znf219、Znf281或Zscan10。