[发明专利]一种春兰SSR引物组及应用该引物组构建春兰品种指纹图谱的方法

权利要求书

1.春兰SSR引物组，其特征在于，包括以下14对SSR引物序列：

2.权利要求1所述的春兰SSR引物组在构建春兰品种指纹图谱中的应用。

3.权利要求1所述的春兰SSR引物组在鉴定春兰品种中的应用。

4.一种春兰品种指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)提取春兰样品的DNA；

(2)以提取的DNA为模板，以权利要求1所述SSR引物组为扩增引物，建立PCR反应体系并进行PCR扩增；

(3)将扩增产物进行毛细管电泳，根据毛细管电泳结果对春兰每个品种的样品DNA的扩增结果形成扩增片段长度数据化编码，构建得到春兰品种指纹图谱。

5.根据权利要求4所述的春兰品种指纹图谱的构建方法，其特征在于，步骤(2)中的PCR反应体系包括：10×PCR Buffer 3μL、2.5mM dNTP 2μL、MgCl₂ 2μL、Primer A 2μL、PrimerB 2μL、Template 1μL、ddH₂O 18μL、Taq酶0.2μL；

所述PCR扩增的反应程序为：95℃5min；95℃30s，60℃30s，72℃30s，30个循环；95℃30s，55℃30s，72℃30s，10个循环；60℃30min；4℃保存。

6.根据权利要求4所述的春兰品种指纹图谱的构建方法，其特征在于，步骤(3)中将扩增产物进行毛细管电泳，根据毛细管电泳结果对春兰每个品种的样品DNA的扩增结果形成扩增片段长度数据化编码，具体为：按照SSR_39969_c0_seq1、SSR_71399_c0_seq1、SSR_256535_c0_seq1、SSR_95792_c0_seq1、SSR_26057_c0_seq1、SSR_56999_c0_seq1、SSR_67726_c0_seq1、SSR_281917_c0_seq1、SSR_288485_c0_seq1、SSR_81676_c0_seq1、SSR_51709_c0_seq1、SSR_83667_c0_seq2、SSR_937370_c0_seq1、SSR_838285_c0_seq1的分子标记顺序排列，通过毛细管电泳结果，依次记录每个春兰品种经每对SSR引物扩增出现的片段长度，依据各个扩增片段长度进行数据化编码，即为该春兰品种的DNA指纹图谱。

7.根据权利要求6所述的春兰品种指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述依据各个扩增片段长度进行数据化编码，具体为：将各位点扩增片段的等位基因按分子量大小排列，等位基因从小到大以阿拉伯数字1-9标注，9个以上的等位基因，以大写英文字母A-Z标注，若该位点在某个品种中无扩增则记为0，每个位点占两位。

8.一种春兰品种指纹图谱，其特征在于，由权利要求4-7任一项所述春兰品种指纹图谱构建方法构建得到。

9.权利要求8所述的春兰品种指纹图谱在鉴定春兰品种中的应用。

10.一种鉴定春兰品种的试剂盒，其特征在于，含有权利要求1所述的春兰SSR引物组。