[发明专利]一种用于核酸提纯的装置及其方法在审
申请号: | 202210884402.7 | 申请日: | 2022-07-25 |
公开(公告)号: | CN115161165A | 公开(公告)日: | 2022-10-11 |
发明(设计)人: | 韦玉梅;孙国庆;石冠蓝;周德江 | 申请(专利权)人: | 成都瀚辰光翼科技有限责任公司;成都瀚辰光翼生物工程有限公司 |
主分类号: | C12M1/12 | 分类号: | C12M1/12;C12M1/00;C12N15/10 |
代理公司: | 北京天奇智新知识产权代理有限公司 11340 | 代理人: | 许驰 |
地址: | 610000 四川省成都市高新区*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 核酸 提纯 装置 及其 方法 | ||
1.一种用于核酸提纯的装置,其特征在于:包括过滤柱和填充在过滤柱里面的核酸过滤芯;所述过滤芯包括纳米磁珠和吸附膜。
2.根据权利要求1所述的用于核酸提纯的装置,其特征在于,所述过滤芯包括至少1层纳米磁珠层和至少2层吸附膜层;所述纳米磁珠层由纳米磁珠组成;所述吸附膜层由吸附膜组成,所述纳米磁珠层和所述吸附膜层交替设置。
3.根据权利要求2所述的用于核酸提纯的装置,其特征在于,所述过滤芯上下两端面均为吸附膜层。
4.根据权利要求1所述的用于核酸提纯的装置,其特征在于,所述过滤芯包括依次设置的第一保护膜层、过滤层和第二保护膜层;过滤层采用吸附膜颗粒和纳米磁珠混合而成。
5.根据权利要求1所述的用于核酸提纯的装置,其特征在于,所述过滤芯包括若干竖直设置在过滤柱中的过滤层;所述过滤层包括吸附膜和附着在吸附膜上的纳米磁珠。
6.根据权利要求1~5任一项所述的用于核酸提纯的装置,其特征在于,所述纳米磁珠为亲水性磁性微球、疏水性磁性微球、羧基磁性微球、氨基磁性微球、环氧基磁性微球中的一种或两种。
7.根据权利要求6所述的用于核酸提纯的装置,其特征在于,还包括设置在所述过滤柱中的防污染滤芯;所述防污染滤芯设置在所述过滤柱远离所述过滤柱进液口的一端。
8.一种核酸提纯的方法,其特征在于,采用权利要求1~7任一项中的核酸提纯装置提纯核酸。
9.根据权利要求8所述的核酸提纯的方法,其特征在于,具体包括以下步骤:
S1)在样本中加入裂解液,加热至55~65℃;
S2)采用权利要求1~7任一项中的核酸提纯装置吸取步骤S1)中加热的裂解液,再排掉;
S3)步骤S2)中的核酸提纯装置吸取洗涤液1,然后排掉洗涤液1;
S4)步骤S3)中的核酸提纯装置吸取洗涤液2,然后排掉洗涤液2;
S5)重复至少一次步骤S4);
S6)步骤S5)中的核酸提纯装置再吸取55~60℃的洗脱液,再排出并收集洗脱液即可。
10.根据权利要求9所述的核酸提纯的方法,其特征在于,所述裂解液的组分包括:0.5M-5M盐酸胍,0.2M-4M氯化钠,10mM-100Mm氯化钙,0.2%-3.6%L-脯氨酸,0.1%-2.4%山梨醇,0.1%-2.0%硫酸铵,10mM-1MTris,0.1%-1%聚乙烯比咯烷酮,0.1%-3%SDS,0.2M-4M PEG8000,0.1%-5%Pluronic L64),0.1%-5%Surfactant 10G,5%-25%异丙醇,0.1%-1%Proclin300,裂解液的pH值为4.0-10.0;
所述洗涤液1的组分包括:0.2M-4M氯化钠,10mM-1M Tris,1mM-50Mm乙二胺四乙酸,0.1%-2%吐温-20,20%-80%乙醇,洗涤液1的pH值为4.0-7.0;
所述洗涤液2的组分包括:0.2M-4M氯化钠,10mM-1M Tris,0.1%-2%吐温-20,洗涤液2的pH值为4.0-7.0;
所述洗脱液的组成包括:10mM-1M Tris,洗脱液的pH值为7.0-10.0。
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