[发明专利]一种用于核酸提纯的装置及其方法在审
申请号: | 202210884402.7 | 申请日: | 2022-07-25 |
公开(公告)号: | CN115161165A | 公开(公告)日: | 2022-10-11 |
发明(设计)人: | 韦玉梅;孙国庆;石冠蓝;周德江 | 申请(专利权)人: | 成都瀚辰光翼科技有限责任公司;成都瀚辰光翼生物工程有限公司 |
主分类号: | C12M1/12 | 分类号: | C12M1/12;C12M1/00;C12N15/10 |
代理公司: | 北京天奇智新知识产权代理有限公司 11340 | 代理人: | 许驰 |
地址: | 610000 四川省成都市高新区*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 核酸 提纯 装置 及其 方法 | ||
本发明涉及一种用于核酸提纯的装置及其方法,涉及核酸提纯技术领域,其中装置包括过滤柱和填充在过滤柱里面的核酸过滤芯;所述过滤芯包括纳米磁珠和吸附膜;本发明所公开的核酸提纯方法为采用本发明所公开的装置进行核酸提纯。本发明所公开的一种用于核酸提纯的装置及其方法采用纳米磁珠和吸附膜同时吸附核酸、同时洗脱,大大提升了核酸的提纯效率和效果,其操作简单方便,提取效果好。
技术领域
本发明涉及核酸提纯技术领域,尤其涉及一种用于核酸提纯的装置及其方法。
背景技术
核酸可分为核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA),是基本的遗传物质;同时核酸在蛋白质的生物合成上也占有重要位置,对生物的生长、遗传、变异等一系列重大生命现象起决定性作用。由于核酸对生物科学的研究和发展具有重要作用,因此如何从样品中将核酸提取出来并整合成易于使用和检测的形式是研究核酸的前提和基础。
核酸的提取目前有主要三种方法:
(1)酚抽提法,是指用苯酚抽提细胞时将蛋白质变性使蛋白溶于酚相,核酸溶于水相,并通过氯仿的反复抽提去掉水相中残留的苯酚,再利用乙醇消除核酸的水化层使核酸沉淀的方式对核酸进行纯化,其操作繁琐且有机溶剂对人体有害。
(2)纳米磁珠法,是指以超顺磁性氧化硅纳米磁性微球为载体,通过磁珠在高盐、低pH溶液中吸附核酸,而在低盐溶液中将核酸从磁珠表面脱离的原理进行核酸提取的方法,其可实现核酸的快速分离纯化,安全且易于自动化实施;但其核酸提取过程中需要经过加液、震荡、吸磁、吸液、干燥、洗脱等等过程,不但条件多样复杂,每个过程对硬件设备的要求很高;
(3)传统膜吸附法,是指通过吸附膜直接吸附溶液中的核酸,再用小体积的水或低离子强度的缓冲液将核酸洗脱出来,其操作相对简单,回收效率高,但其提纯过程中需要反复加样、离心。
发明内容
本发明为了解决上述技术问题提供了一种用于核酸提纯的装置,采用磁珠和吸附膜混用,实现核酸的快速提纯。
本发明还提供了一种核酸提纯的方法,采用本申请文件装置进行核酸提纯,其提纯过程简单、易于操作。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下:一种用于核酸提纯的装置,包括过滤柱和填充在过滤柱里面的核酸过滤芯;所述过滤芯包括纳米磁珠和吸附膜。
在上述技术方案中,过滤柱上设置有一段内径较大的膨大区域,膨大区域两端连接的部分过滤柱的内径均较小,磁珠和吸附膜形成的过滤芯就被填充在该膨大区域内,使核酸在该区域内通过磁珠和吸附膜被充分吸附,再通过洗脱液洗脱后,实现提纯。
进一步地,所述过滤芯包括至少1层纳米磁珠层和至少2层吸附膜层;所述纳米磁珠层由纳米磁珠组成;所述吸附膜层由吸附膜组成,所述纳米磁珠层和所述吸附膜层交替设置。
进一步地,所述过滤芯上下两端面均为吸附膜层;所述吸附膜层为硅胶膜和/玻璃纤维膜,通过吸附膜层将纳米磁珠层固定在过滤芯中,避免纳米磁珠的漏出,无需另外设置保护膜层。
进一步地,所述过滤芯包括依次设置的第一保护膜层、过滤层和第二保护膜层;过滤层采用吸附膜颗粒和纳米磁珠混合而成。其中吸附膜颗粒可以为硅胶膜颗粒和/或玻璃纤维膜颗粒;当所述吸附膜颗粒为硅胶膜颗粒和玻璃纤维膜颗粒时,硅胶膜颗粒与玻璃纤维膜颗粒的质量比为:1:0.1~10。
进一步地,所述过滤芯包括若干竖直设置在过滤柱中的过滤层;所述过滤层包括吸附膜和附着在吸附膜上的纳米磁珠。
进一步地,所述纳米磁珠为亲水性磁性微球、疏水性磁性微球、羧基磁性微球、氨基磁性微球、环氧基磁性微球中的一种或两种,纳米磁珠的粒径为50nm~2μm,当两种纳米磁珠混用时,两种纳米磁珠的质量比为1:0.1~10。此处所述的亲水性磁性微球、疏水性磁性微球、羧基磁性微球、氨基磁性微球、环氧基磁性微球是指纳米磁珠表面的功能基团分别为亲水性基团、疏水性基团、羧基、氨基、环氧基。
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