[发明专利]在青蒿中过表达AaMAPK6基因在提高青蒿素含量中的应用及方法在审

专利信息
申请号: 202210907065.9 申请日: 2022-07-29
公开(公告)号: CN116334109A 公开(公告)日: 2023-06-27
发明(设计)人: 张芳源;廖志华;王诗艺 申请(专利权)人: 西南大学
主分类号: C12N15/54 分类号: C12N15/54;C12N15/84;A01H5/00;A01H6/14
代理公司: 重庆航图知识产权代理事务所(普通合伙) 50247 代理人: 王贵君
地址: 400715*** 国省代码: 重庆;50
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摘要:
搜索关键词: 青蒿 表达 aamapk6 基因 提高 青蒿素 含量 中的 应用 方法
【权利要求书】:

1.在青蒿中过表达AaMAPK6基因在提高青蒿素含量中的应用,其特征在于:所述AaMAPK6基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

2.一种提高青蒿中青蒿素含量的方法,其特征在于,包含如下步骤:通过在青蒿中过表达AaMAPK6基因,所述AaMAPK6基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

3.根据权利要求2所述提高青蒿中青蒿素含量的方法,其特征在于:所述在青蒿中过表达AaMAPK6基因的方法具体为:将AaMAPK6基因构建到植物双元表达载体上,然后在农杆菌介导下转化青蒿,筛选转基因植株,筛选到青蒿素含量提高的转基因植株。

4.根据权利要求3所述提高青蒿中青蒿素含量的方法,其特征在于:所述植物双元表达载体为以pHB载体为骨架载体。

5.根据权利要求3所述提高青蒿中青蒿素含量的方法,其特征在于:所述植物双元表达载体是将AaMAPK6基因通过BamHI和XbaI位点构建到pHB载体上。

6.根据权利要求3所述提高青蒿中青蒿素含量的方法,其特征在于:所述农杆菌为EHA105。

7.根据权利要求3所述提高青蒿中青蒿素含量的方法,其特征在于:所述筛选转基因植株的方法是采用荧光定量RCR检测。

8.根据权利要求7所述提高青蒿中青蒿素含量的方法,其特征在于:所述荧光定量RCR的上游引物如SEQ ID NO.10所示,下游引物如SEQ ID NO.11所示。

9.根据权利要求7所述提高青蒿中青蒿素含量的方法,其特征在于:所述荧光定量RCR的反应条件为:94℃预变性3min;94℃变性10s,58℃退火20s,72℃延伸20s,40个扩增循环,每个循环的72℃延伸结束后采集荧光。

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