[发明专利]一种量子点纳米荧光微球标记的双T增敏免疫层析检测卡及其应用在审
申请号: | 202210918883.9 | 申请日: | 2022-08-02 |
公开(公告)号: | CN115951048A | 公开(公告)日: | 2023-04-11 |
发明(设计)人: | 聂会忠;高志芳;王连峰;王占甫;王占军;王良楷;王灿;安纬林;曹璐 | 申请(专利权)人: | 大连交通大学;中瑞德泰生物科技集团有限公司 |
主分类号: | G01N33/558 | 分类号: | G01N33/558;G01N33/569;G01N33/533;G01N33/58 |
代理公司: | 北京正理专利代理有限公司 11257 | 代理人: | 赵晓丹 |
地址: | 116028 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 量子 纳米 荧光 标记 免疫 层析 检测 及其 应用 | ||
1.一种量子点纳米荧光微球标记的双T增敏免疫层析试纸条,所述试纸条包括PVC背板及设置在PVC背板上的依次排列的样品垫、结合垫、反应垫和吸收垫,邻垫之间须部分重叠,其特征在于,所述反应垫上从靠近所述结合垫端到靠近所述吸收垫端依次设置相互平行的检测线T2线、检测线T1线和质控线C线,检测线T1线和检测线T2线均包被重组串联VP1蛋白,质控线包被有羊抗鼠IgG抗体;所述结合垫含有量子点荧光微球定向标记的鼠抗猪IgG抗体;其中,
所述重组串联VP1蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的双T增敏免疫层析试纸条,其特征在于,所述量子点荧光微球选择粒径在100~150nM范围内,荧光效率大于70%,微球表面含有10~15%羟基化修饰的量子点荧光微球。
3.根据权利要求1所述的双T增敏免疫层析试纸条,其特征在于,所述检测线T1线和检测线T2线之间的距离为3~4mm,检测线T1线、质控线C线之间的距离为3~4mm。
4.根据权利要求1所述的双T增敏免疫层析试纸条,其特征在于,所述重组串联VP1蛋白在检测线T1线和检测线T2线上的包被量为0.5~1.5μg/cm2;优选的,所述羊抗鼠IgG抗体在质控线C线上的包被量为0.4~0.8μg/cm2。
5.根据权利要求1所述的双T增敏免疫层析试纸条,其特征在于,所述量子点荧光微球定向标记的鼠抗猪IgG抗体在结合垫上的含量为4.0~8.0μg/cm2。
6.权利要求1-5任一所述的双T增敏免疫层析试纸条的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
结合垫的制备:将量子点荧光微球定向标记的鼠抗猪IgG抗体均匀喷涂在浸泡干燥后的玻璃纤维上,干燥,得到结合垫;
反应垫的制备:将重组串联VP1蛋白包被于硝酸纤维素膜作为检测线T1线和检测线T2线,将羊抗鼠IgG抗体包被于硝酸纤维素膜作为质控线C线,封闭,干燥,得到反应垫;
组装:依次将反应垫、吸收垫、结合垫和样本垫粘附在PVC背板上,邻垫之间部分重叠,切割,即得。
7.一种量子点纳米荧光微球标记的双T增敏免疫层析检测卡,其特征在于,所述双T增敏免疫层析检测卡包括权利要求1-5任一双T增敏免疫层析试纸条和装载权利要求1-5任一双T增敏免疫层析试纸条的检测卡壳。
8.权利要求1-5所述的双T增敏免疫层析试纸条或权利要求7所述的双T增敏免疫层析检测卡在如下任一中的应用:
A、检测待测样本中猪口蹄疫病毒VP1抗体的浓度;
B、检测待测样本中是否含有猪口蹄疫病毒VP1抗体。
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