[发明专利]一种用于检测凝血酶活性及凝血酶抑制剂活性的荧光传感器及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种用于检测凝血酶活性及凝血酶抑制剂活性的荧光传感器，其特征在于，所述荧光传感器包括由聚集诱导发光探针与凝血酶发色底物交联得到的纳米颗粒。

2.如权利要求1所述的用于检测凝血酶活性及凝血酶抑制剂活性的荧光传感器的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

将聚集诱导发光探针、凝血酶发色底物、交联剂与溶剂混合，即得。

3.如权利要求2所述的用于检测凝血酶活性及凝血酶抑制剂活性的荧光传感器的制备方法，其特征在于，所述聚集诱导发光探针与凝血酶发色底物的浓度比为1:(5-30)，优选为1:(12-18)；

优选地，所述交联剂包括戊二醛；

优选地，在所述混合后得到的混合液中，所述交联剂的稀释倍数为150-400倍，优选为300-400倍；

优选地，所述溶剂包括有机溶剂和水，所述有机溶剂包括四氢呋喃；

优选地，在所述混合后得到的混合液中，所述有机溶剂的稀释倍数为15-40倍，优选为30-40倍；

优选地，所述混合的时间为20-240min，优选为20-40min；

优选地，所述混合的温度为15-40℃；

优选地，所述混合在搅拌下进行，所述搅拌的速度为100-700rpm，优选为150-250rpm；

优选地，所述混合后还包括避光静置除去有机溶剂。

4.如权利要求1所述的用于检测凝血酶活性及凝血酶抑制剂活性的荧光传感器在制备凝血酶活性检测试剂盒和/或凝血酶抑制剂活性检测试剂盒中的应用。

5.一种凝血酶活性的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括将凝血酶与如权利要求1所述的用于检测凝血酶活性及凝血酶抑制剂活性的荧光传感器混合后，检测荧光强度，利用标准曲线法得到凝血酶活性结果。

6.如权利要求5所述的凝血酶活性的检测方法，其特征在于，所述混合的时间为10-30min；

优选地，所述混合的温度为20-40℃。

7.一种检测凝血酶抑制剂活性的方法，其特征在于，所述方法包括：测定如权利要求1所述的用于检测凝血酶活性及凝血酶抑制剂活性的荧光传感器的荧光强度，记为A0；将凝血酶与荧光传感器混合后，检测荧光强度，记为A1；将待测凝血酶抑制剂、凝血酶与荧光传感器混合后，检测荧光强度，记为A2；按照公式B＝(A2-A1)/(A0-A1)×100％计算得到待测凝血酶抑制剂对凝血酶活性的抑制率B。

8.如权利要求7所述的检测凝血酶抑制剂活性的方法，其特征在于，所述混合的时间为10-30min；

优选地，所述混合的温度为20-40℃。

9.一种药物中抗凝血成分的筛选方法，其特征在于，所述筛选方法包括：利用液相色谱分离药物组分，收集各组分，利用如权利要求7-8中任一项所述的检测凝血酶抑制剂活性的方法得到各组分对凝血酶活性的抑制率，将测得的抑制率较高的组分用质谱进行定性分析，即得药物中抗凝血成分信息。

10.如权利要求9所述的药物中抗凝血成分的筛选方法，其特征在于，所述药物包括中药；

优选地，所述中药包括血必净。