[发明专利]一种采用LC-MS法检测血浆中替米沙坦氨氯地平的方法

权利要求书

1.一种采用LC-MS法检测血浆中替米沙坦氨氯地平的方法，包括以下步骤：

1)取血浆样品用0.5％氨水-乙腈溶液进行蛋白沉淀处理，

2)取蛋白沉淀后的上清液用超纯水稀释后注入LC-MS/MS仪检测，

其中，色谱条件包括：色谱柱为C18硅胶柱，甲酸铵-甲酸-水溶液为流动相A，甲酸-乙腈溶液为流动相B，采用梯度洗脱法。

2.如权利要求1所述的方法，所述梯度洗脱法，其梯度变化如下：

3.如权利要求1所述的方法，步骤1)中所述蛋白沉淀处理包括：取血浆样品，加入蛋白沉淀剂0.5％氨水-乙腈溶液，振摇、离心，取蛋白提取上清液。

4.如权利要求3所述的方法，步骤1)中所述的蛋白沉淀具体包括，血浆样品与蛋白沉淀剂混合后，振摇1min，离心8min(8℃，12000rpm)，取蛋白提取上清液备用。

5.如权利要求3或4所述的方法，血浆样品与蛋白沉淀剂的体积比为1:2，所述蛋白沉淀剂，乙腈与氨水的体积比为199:1。

6.如权利要求1所述的方法，所述色谱条件为：以5mM甲酸铵-0.1％甲酸-水溶液为流动相A，0.1％甲酸-乙腈溶液为流动相B，ACQPITY UPLC BEH C18 1.7μm2.1x100mm为色谱柱，柱温35℃，流速0.3ml/min，进样量5μL。

7.如权利要求1所述的方法，其质谱条件包括：离子模式为ESI⁺，毛细管电压1.0kV，去溶剂温度500℃，去溶剂流速1000L/H，离子源温度150℃，反吹流速150L/Hr，分析室气体6.0Bar。

8.如权利要求1所述的方法，步骤1)的血浆量为0.2mL，步骤2)的蛋白提取上清液为0.35mL，稀释用超纯水的量为0.1mL，其中，蛋白提取上清液/超纯水的体积比为7:2。

9.如权利要求8所述的方法，进一步包括在血浆中加入10μL内标工作液混匀，所述内标工作液为40ng.mL^-1的替米沙坦-d3与20ng.mL^-1的氨氯地平-d4混合溶液，其溶剂为体积比乙腈：水＝7:13的混合溶剂。

10.如权利要求8所述的方法，所述稀释具体包括，蛋白提取上清液与超纯水混合后，振摇1min，离心5min(8℃，12000rpm)，再取稀释后上清液进样。