[发明专利]一种新冠抗原检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种新冠抗原检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1制备抗体包被的硝酸纤维素膜：检测抗体单克隆抗2019-nCoV N蛋白抗体1用膜包被液进行浓度配制，质控抗体羊抗鸡IgY用膜包被液进行浓度配制，再将检测抗体单克隆抗2019-nCoV N蛋白抗体1和质控抗体羊抗鸡IgY包被到硝酸纤维素膜上，干燥备用；

S2处理样品垫：采用处理液处理样品垫，并将处理好的样品垫放入烘箱进行干燥，干燥后备用；

S3标记、制备喷金结合垫：将单克隆抗2019-nCoV N蛋白抗体2和鸡IgY分别和双色微球颗粒标记，再将标记后单克隆抗2019-nCoV N蛋白抗体2和鸡IgY与双色微球结合物用微球保存液分别稀释成单克隆抗2019-nCoV N蛋白抗体2-双色微球结合物喷金溶液和鸡IgY-双色微球结合物喷金溶液，并喷到结合垫上后，置于干燥间，放入烘箱干燥，干燥后备用；

S4检测卡组装：将已包被的硝酸纤维素膜、已喷金结合垫、已处理样品垫和吸水纸切割后并粘贴成检测板，将粘贴好的检测板放入相应的卡壳中进行检测卡组装，获得检测卡。

2.根据权利要求1所述的新冠抗原检测试剂盒的制备方法，其特征在于，还包括步骤S5样本抽提液配制：配制并分装样本抽提液；所述抽提液用于对样本进行抽提，作为新冠抗原检测试剂盒的组成部分进行样本检测。

3.根据权利要求2所述的新冠抗原检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述步骤S1具体步骤为：

S11：配制检测线包被液，并在检测线包被液中添加检测抗体单克隆抗2019-nCoV N蛋白抗体1，使得检测抗体单克隆抗2019-nCoV N蛋白抗体1的终浓度为1.0～2.5mg/mL；

S12：配制质控线包被液，并在质控线包被液中添加质控抗体羊抗鸡IgY，使得质控抗体羊抗鸡IgY的终浓度为1.0mg/mL；

S13：将添加检测抗体单克隆抗2019-nCoV N蛋白抗体1的检测线包被液和添加质控抗体羊抗鸡IgY的质控线包被液用划膜机按1μL/cm的量包被于硝酸纤维素膜的测试区和质控区；

S14：放入45℃烘箱干燥，烘干时间为12～20h，干燥备用。

4.根据权利要求3所述的新冠抗原检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述步骤S3的具体步骤为：

S31：将微球标记液与双色微球颗粒混合后分别进行单克隆抗2019-nCoV N蛋白抗体2和鸡IgY的标记反应，离心后分别制得单克隆抗2019-nCoV N蛋白抗体2-双色微球结合物和鸡IgY-双色微球标记物；

S32：再将单克隆抗2019-nCoV N蛋白抗体2-双色微球结合物和鸡IgY-双色微球标记物用微球保存液分别稀释成单克隆抗2019-nCoV N蛋白抗体2-双色微球结合物喷金溶液和鸡IgY-双色微球结合物喷金溶液，将喷金溶液通过划膜喷金仪喷到步骤S2中处理好的结合垫上，放入45℃烘箱干燥，烘干4h，干燥备用。

5.根据权利要求4所述的新冠抗原检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述步骤S31中微球标记液包括5mM MES或5mM HEPES或10mM PB，所述双色微球颗粒的粒径为100～300nm；所述单克隆抗2019-nCoV N蛋白抗体2标记抗体与双色微球颗粒的质量比为(10～20):1。

6.根据权利要求5所述的新冠抗原检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述步骤S32中将2019-nCoV N蛋白抗体2标记抗体-双色微球结合物稀释成1～2.5mg/mL的抗体-微球结合物喷金溶液；所述鸡IgY-双色微球结合物的浓度为0.3～1mg/mL；所述划膜喷金仪按2.0μL/cm喷量进行喷金。

7.根据权利要求4所述的新冠抗原检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述步骤S5中的所述抽提液的配方按质量或体积百分比包括：PBS缓冲液10nM、1～2％的乳化剂和0.01～0.03％的Proclin 300，pH值为7.4～7.8±1。