[发明专利]一种新冠抗原检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明涉及一种新冠抗原检测试剂盒及制备方法，步骤：S1制备抗体包被的硝酸纤维素膜：检测抗体单克隆抗2019‑nCoV N蛋白抗体1和质控抗体羊抗鸡IgY分别用膜包被液进行浓度配制，再分别包被到硝酸纤维素膜上；S2处理样品垫；S3标记、制备喷金结合垫：将单克隆抗2019‑nCoV N蛋白抗体2和鸡IgY分别和双色微球结合，再分别稀释成单克隆抗2019‑nCoV N蛋白抗体2‑双色微球结合物喷金溶液和鸡IgY‑双色微球结合物喷金溶液，并喷到结合垫上后干燥；S4将已包被的膜、已喷金结合垫、已处理样品垫和吸水纸切割后并粘贴成检测板，将粘贴好的检测板放入相应的卡壳中进行组装获得检测卡。

技术领域

本发明涉及荧光免疫检测技术领域，涉及一种新冠抗原检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

新型冠状病毒是一种可引起人肺炎/肺部感染的新的冠状病毒，它与已知可引起感冒、严重急性呼吸综合症(SARS)和中东呼吸综合症(MERS)同属一个冠状病毒家族，世界卫生组织(WHO)已将其命名为2019新型冠状病毒，即2019-nCoV。新型冠状病毒肺炎是一种严重的II类传染病，传染性强，死亡率3～6％，为2020年世界经济发展造成了巨大破坏。新型冠状病毒检测目前有三种，分别为：核酸检测、抗体检测、抗原检测。三种检测方法的窗口期有所区别，核酸/抗体/抗原检测各有侧重，不能相互替代，应用多种方法联合检测，可有效缩短检测窗口期，提高阳性检出率，为各种可能的风险人群提供双重保障。

中国专利文献(申请号：202120754366.3)公开了一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，由胶体金免疫层析检测试纸条和检测夹组成，检测夹由表面张力减弱装置和检测结果观察组件可拆卸的连接；检测夹为空心结构，检测试纸条可拆卸的放置在检测夹内。

发明内容

本发明的目的是提供一种新冠抗原检测试剂盒的制备方法，所制备的新冠抗原检测试剂盒采用荧光免疫检测技术可以提供快速准确的检测结果，通过荧光染料和彩色染料同时染色聚苯乙烯微球，既可以用眼睛定性看，又可以用仪器检测荧光信号，且成本低廉、灵敏度高，检测更灵活，适用范围更广，从而更好地应对新形势下的新型冠状病毒传播。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是，该新冠抗原检测试剂盒的制备方法，包括以下步骤：

S1制备抗体包被的硝酸纤维素膜：检测抗体单克隆抗2019-nCoV N蛋白抗体1用膜包被液进行浓度配制，质控抗体羊抗鸡IgY用膜包被液进行浓度配制，再将检测抗体单克隆抗2019-nCoV N蛋白抗体1和质控抗体羊抗鸡IgY包被到硝酸纤维素膜上，干燥备用；

S2处理样品垫：采用处理液处理样品垫，并将处理好的样品垫放入烘箱进行干燥，干燥后备用；

S3标记、制备喷金结合垫：将单克隆抗2019-nCoV N蛋白抗体2和鸡IgY分别和双色微球标记，再将标记后单克隆抗2019-nCoV N蛋白抗体2和鸡IgY与双色微球结合物用微球保存液分别稀释成单克隆抗2019-nCoV N蛋白抗体2-双色微球结合物喷金溶液和鸡IgY-双色微球结合物喷金溶液，并喷到结合垫上后，置于干燥间，放入烘箱干燥，干燥后备用；

S4检测卡组装：将已包被的硝酸纤维素膜、已喷金结合垫、已处理样品垫和吸水纸切割后并粘贴成检测板，将粘贴好的检测板放入相应的卡壳中进行检测卡组装，获得检测卡。

作为本发明的优选技术方案，还包括步骤S5样本抽提液配制：配制并分装样本抽提液；所述抽提液用于对样本进行抽提，作为新冠抗原检测试剂盒的组成部分进行样本检测。

作为本发明的优选技术方案，所述步骤S1具体步骤为：

S11：配制检测线包被液，并在检测线包被液中添加检测抗体单克隆抗2019-nCoVN蛋白抗体1，使得检测抗体单克隆抗2019-nCoV N蛋白抗体1的终浓度为1.0～2.5mg/mL；