[发明专利]一种索马鲁肽修饰剂中同系物杂质的分离检测方法

权利要求书

1.一种索马鲁肽修饰剂中同系物杂质的分离检测方法，其特征在于，包括：采用高效液相色谱仪对供试品溶液进行检测，利用流动相A和流动相B按不同的比例混合作为流动相进行梯度洗脱，利用面积归一化法计算杂质含量；

其中，所述流动相A是由磷酸盐缓冲液和乙腈混合而得；

所述流动相B是利用磷酸盐缓冲液、乙腈和水混合而得；

用于配置所述流动相A和所述流动相B的所述磷酸盐缓冲液的pH值为3.5～5.0。

2.根据权利要求1所述的分离检测方法，其特征在于，所述流动相A的制备过程包括：将所述磷酸盐缓冲液和乙腈混合，过滤，所述磷酸盐缓冲液和乙腈的体积比为17～21:1。

3.根据权利要求1所述的分离检测方法，其特征在于，所述流动相B的制备过程包括：将所述磷酸盐缓冲液、乙腈和水混合，过滤，所述磷酸盐缓冲液、乙腈和水的体积比为0.8～1.2:7～9:1。

4.根据权利要求1所述的分离检测方法，其特征在于，用于配置所述流动相A和所述流动相B的所述磷酸盐缓冲液的制备过程包括：将磷酸二氢盐和水混合，用磷酸调节pH值为3.5～5.0；

优选地，在制备所述磷酸盐缓冲液的过程中，所述磷酸二氢盐为磷酸二氢钾，每1L水对应所述磷酸二氢钾的用量为4.0g～4.3g。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的分离检测方法，其特征在于，洗脱程序如下：

当时间为0.0min时，混合流动相中流动相A的体积分数为50-70％，流动相B的体积分数为30-50％；

当时间为10.0min时，混合流动相中流动相A的体积分数为25-30％，流动相B的体积分数为70-75％；

当时间为20.0min时，混合流动相中流动相A的体积分数为10-20％，流动相B的体积分数为80-90％；

当时间为55.0min时，混合流动相中流动相A的体积分数为10-20％，流动相B的体积分数为80-90％。

6.根据权利要求1所述的分离检测方法，其特征在于，所述供试品溶液是将待测样品与稀释剂混合，控制待测样品在所述供试品溶液中的浓度为1mg/mL～3mg/mL；

其中，所述待测样品中含有索马鲁肽修饰剂X6及同系物，所述同系物包括C14、C15、C16、C17、C19和C20衍生物。

7.根据权利要求6所述的分离检测方法，其特征在于，所述稀释剂为乙腈或甲醇。

8.根据权利要求1所述的分离检测方法，其特征在于，色谱条件：柱温为45℃～55℃，流速为0.9mL/min～1.1mL/min，检测波长为200nm～220nm，进样量为15μL～25μL。

9.根据权利要求8所述的分离检测方法，其特征在于，所采用的色谱柱为AgilentPoroshell 120EC-C18。

10.根据权利要求9所述的分离检测方法，其特征在于，色谱柱的长度为90mm～120mm，内径为4mm～5mm，填料粒径为2μm～3μm，所述色谱柱的填料是由1.5μm-2.0μm直径的实心核和0.3μm-0.7μm厚的多孔外层构成的小粒径填料；

或，所述色谱柱的填料为亚2微米全多孔填料。