[发明专利]一种索马鲁肽修饰剂中同系物杂质的分离检测方法

说明书

本发明公开了一种索马鲁肽修饰剂中同系物杂质的分离检测方法，涉及医药中间体分析技术领域。采用高效液相色谱仪对供试品溶液进行检测，利用流动相A和流动相B按不同的比例混合作为流动相进行梯度洗脱，利用面积归一化法计算杂质含量；其中，流动相A是由磷酸盐缓冲液和乙腈混合而得；流动相B是利用磷酸盐缓冲液、乙腈和水混合而得；用于配置流动相A和流动相B的所述磷酸盐缓冲液的pH值为3.5～5.0。利用高效液相色谱方法，通过优化色谱条件和洗脱条件能够在较短的时间内将索马鲁肽修饰剂中同系物杂质进行有效分离，具有较好的专属性和精密度，有利于控制终产品的质量。

技术领域

本发明涉及医药中间体分析技术领域，具体而言，涉及一种索马鲁肽修饰剂中同系物杂质的分离检测方法。

背景技术

索马鲁肽(semaglutide)(别名：索玛鲁肽、司美格鲁肽)是由丹麦诺和诺德公司开发的新一代GLP-1(胰高血糖素样肽-1)类似物，索马鲁肽是基于利拉鲁肽基本结构而开发的长效剂型，其治疗2型糖尿病的效果更好。是继艾塞那肽、利拉鲁肽、阿比鲁肽、度拉糖肽、利司那肽、贝那鲁肽(中国批准)之后，全球第7个上市的GLP-1受体激动剂，也是全球第三款长效GLP-1周制剂。

在索马鲁肽的生产过程中，修饰剂的中的杂质情况尤其是同系物会影响最终产品的品质，若能够在短时间内检测修饰剂中的杂质情况，对于控制终产品的质量至关重要。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种索马鲁肽修饰剂中同系物杂质的分离检测方法，能够在较短时间内检测修饰剂X6的杂质情况，从而控制终产品的质量，具有良好的专属性和精密度。

本发明是这样实现的：

第一方面，本发明提供一种索马鲁肽修饰剂中同系物杂质的分离检测方法，包括：采用高效液相色谱仪对供试品溶液进行检测，利用流动相A和流动相B按不同的比例混合作为流动相进行梯度洗脱，利用面积归一化法计算杂质含量；

其中，流动相A是由磷酸盐缓冲液和乙腈混合而得；

流动相B是利用磷酸盐缓冲液、乙腈和水混合而得；

用于配置流动相A和流动相B的磷酸盐缓冲液的pH值为3.5～5.0。

在可选的实施方式中，流动相A的制备过程包括：将磷酸盐缓冲液和乙腈混合，过滤，磷酸盐缓冲液和乙腈的体积比为17～21:1。

在可选的实施方式中，流动相B的制备过程包括：将磷酸盐缓冲液、乙腈和水混合，过滤，磷酸盐缓冲液、乙腈和水的体积比为0.8～1.2:7～9:1。

在可选的实施方式中，用于配置流动相A和流动相B的磷酸盐缓冲液的制备过程包括：将磷酸二氢盐和水混合，用磷酸调节pH值为3.5～5.0；

优选地，在制备磷酸盐缓冲液的过程中，磷酸二氢盐为磷酸二氢钾，每1L水对应磷酸二氢钾的用量为4.0g～4.3g。

在可选的实施方式中，洗脱程序如下：

当时间为0.0min时，混合流动相中流动相A的体积分数为50-70％，流动相B的体积分数为30-50％；

当时间为10.0min时，混合流动相中流动相A的体积分数为25-30％，流动相B的体积分数为70-75％；

当时间为20.0min时，混合流动相中流动相A的体积分数为10-20％，流动相B的体积分数为80-90％；

当时间为55.0min时，混合流动相中流动相A的体积分数为10-20％，流动相B的体积分数为80-90％。

在可选的实施方式中，供试品溶液是将待测样品与稀释剂混合，控制待测样品在供试品溶液中的浓度为1mg/mL～3mg/mL；