[发明专利]一种用于鉴定黄精属种质资源的CDDP分子标记引物组及其应用在审
申请号: | 202210953145.8 | 申请日: | 2022-08-09 |
公开(公告)号: | CN115820899A | 公开(公告)日: | 2023-03-21 |
发明(设计)人: | 金青;杨旭;张文武;张宽朝;蔡永萍 | 申请(专利权)人: | 安徽农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 黄明光 |
地址: | 230036 安徽*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 鉴定 黄精 种质 资源 cddp 分子 标记 引物 及其 应用 | ||
1.一种用于鉴定黄精属种质资源的CDDP分子标记引物组,其特征在于,所述CDDP分子标记引物组针对WRKY、MYB、ERF、KNOX和MADS设计得到。
2.根据权利要求1所述的CDDP分子标记引物组,其特征在于,所述CDDP分子标记引物组包括WRKY-R1、WRKY-R2、WRKY-R3、WRKY-R3B、Myb2、ERF2、KNOX-2、KNOX-3、MADS-1、MADS-2和MADS-4;
所述WRKY-R1、WRKY-R2、WRKY-R3、WRKY-R3B、Myb2、ERF2、KNOX-2、KNOX-3、MADS-1、MADS-2和MADS-4的核苷酸序列如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.11所示。
3.一种用于鉴定黄精属种质资源的试剂盒,其特征在于,包括权利要求1或2所述的CDDP分子标记引物组。
4.权利要求1或2所述的CDDP分子标记引物组或权利要求3所述的试剂盒在黄精属种质鉴定中的应用。
5.权利要求1或2所述的CDDP分子标记引物组或权利要求3所述的试剂盒在黄精属遗传多样性分析中的应用。
6.权利要求1或2所述的CDDP分子标记引物组或权利要求3所述的试剂盒在黄精属分子育种中的应用。
7.根据权利要求4~6任一项所述的应用,其特征在于,所述黄精属包括黄精、多花黄精、滇黄精、湖北黄精和玉竹。
8.一种鉴定黄精属种质资源的方法,其特征在于,包括如下步骤:
利用权利要求1或2所述的CDDP分子标记引物组对黄精种质基因组DNA进行PCR扩增,得到PCR扩增产物;
采用凝胶电泳对所述PCR扩增产物进行检测,得到谱带信息;
对所述谱带信息进行统计分析,根据统计结果判断黄精属种质。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述统计分析包括矩阵分析、聚类分析、主坐标分析和遗传多样性参数统计。
10.根据权利要求8或9所述的方法,其特征在于,所述PCR扩增的反应体系包括10×PCRbuffer 10μL、基因组DNA 50ng、10μmol/L引物组1.5μL,ddH2O补足至20μL;
所述PCR扩增的程序为:94℃预变性3min;94℃变性1min,50℃退火1min,72℃延伸2min,共35个循环;72℃延伸7min。
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