[发明专利]一种苹果果实红肉性状鉴定方法及特异引物对在审
| 申请号： | 202210955220.4 | 申请日： | 2022-08-10 |
| 公开（公告）号： | CN116064892A | 公开（公告）日： | 2023-05-05 |
| 发明（设计）人： | 王楠;刘文军;陈学森;张宗营;于蕾;梅卓欣;李志强;张淑辉;张静;毛志泉 | 申请（专利权）人： | 山东农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11;A01H1/02;A01H1/04 |
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| 地址： | 271018 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 苹果 果实 性状 鉴定 方法 特异 引物 | ||
1.引物对，命名为特异引物对乙，由序列表的序列5所示的单链DNA分子和序列表的序列6所示的单链DNA分子组成。
2.权利要求1所述特异引物对乙在鉴定苹果果肉花青苷含量中的应用。
3.权利要求1所述特异引物对乙在鉴定或选育红肉苹果中的应用。
4.一种鉴定苹果植株的果肉花青苷含量的方法，包括如下步骤：
以供试苹果植株的基因组DNA为模板，采用权利要求1所述特异引物对乙进行PCR扩增；
如果PCR扩增产物为一种且大小为385bp，供试苹果植株为M1M1基因型；如果PCR扩增产物为两种且大小分别为385bp和222bp，供试苹果植株为M1M2基因型；
M1M1基因型苹果植株的果肉花青苷含量高于M1M2基因型苹果植株的果肉花青苷含量。
5.一种鉴定或选育生产红肉苹果的苹果植株的方法，包括如下步骤：
以供试苹果植株的基因组DNA为模板，采用权利要求1所述特异引物对乙进行PCR扩增；如果PCR扩增产物为一种且大小为385bp，供试苹果植株为M1M1基因型；M1M1基因型苹果植株为候选的生产红肉苹果的苹果植株。
6.引物组合，由特异引物对甲和特异引物对乙组成；
所述特异引物对甲由序列表的序列1所示的单链DNA分子和序列表的序列2所示的单链DNA分子组成；
所述特异引物对乙为权利要求1所述特异引物对乙。
7.权利要求6所述引物组合在鉴定苹果果肉花青苷含量中的应用。
8.权利要求6所述引物组合在鉴定或选育红肉苹果中的应用。
9.一种苹果育种方法，包括如下步骤：
(1)将R1R1基因型的苹果品种和R6R6基因型的苹果品种进行杂交，获得杂交后代；
(2)从R1R6基因型的杂交后代中选择M1M1基因型的植株；
R1R1基因型、R6R6基因型和R1R6基因型的判断方法如下：以供试苹果植株的基因组DNA为模板，采用权利要求6中所述的特异引物对甲进行PCR扩增，如果PCR扩增产物显示为一条带且大小为493bp，供试苹果植株为R6R6基因型；如果PCR扩增产物显示为一条带且大小为392bp，供试苹果植株为R1R1基因型；如果PCR扩增产物显示为两条带且大小分别为493bp和392bp，供试苹果植株为R1R6基因型；
M1M1基因型的判断方法如下：以供试苹果植株的基因组DNA为模板，采用权利要求1中所述的特异引物对乙进行PCR扩增；如果PCR扩增产物为一种且大小为385bp，供试苹果植株为M1M1基因型。
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