[发明专利]ZNF781基因在制备宫颈癌诊断试剂中的应用

说明书

本发明公开了ZNF781基因在制备宫颈癌诊断试剂中的应用。本发明方案将ZNF781基因用于制备宫颈癌诊断试剂，扩增得到的目标序列短，扩增效率高，可用于准确检测宫颈癌，操作简单、快捷、低成本，适用于临床检测。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及ZNF781基因在制备宫颈癌诊断试剂中的应用。

背景技术

宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一，排在乳腺癌之后，其发病进程由正常宫颈细胞且发病率呈现年轻化趋势。99％的宫颈癌患者的宫颈脱落细胞中检测到人类乳头状瘤病毒(Human Papillomavirus，HPV)，因此宫颈高级病变和宫颈癌作为病因明确的疾病，可做到早预防、早干预；在HPV感染中，91％的HPV病毒为一过性感染可被自身免疫系统清除，正常的宫颈细胞经过癌前病变发展到浸润癌有5-10年的潜伏期，因此早发现、早诊断、早治疗是预防宫颈癌的重要手段。

宫颈癌筛查以早期发现高级别癌前病变并进行阻断性治疗为目标，尽早筛查、及时发现和适当治疗是防治宫颈癌的重要手段。宫颈癌的筛查技术经历了几十年的发展，目前用于宫颈癌筛查的主要分为三种，一种是目测法，直接用肉眼观察经化学处理后细胞的变化，一种是采集宫颈脱落细胞，观察细胞形态学的变化，还有一种检测高危型HPV病毒。

目前临床上应用的宫颈癌筛查手段为女性健康做出了巨大贡献，同时也存在其不可避免的缺陷：首先，传统的细胞学筛查手段，包括巴士涂片及液基细胞学(TCT)，因为其整个过程包括取样、抹片制备、观察、结果判读等多个环节受人为因素影响较大，造成漏检几率较高。其次，近年兴起的病原学筛查HPV-DNA检测技术，因其检测的仅是HPV病原存在与否，而HPV病毒的存在大部分是一过性的，也意味着这些被自身免疫清除掉的HPV感染者也会被判定为阳性，从而导致过度医疗。发明人期望挖掘出能与癌前病变紧密相关的分子指标，以弥补目前我国临床上应用的宫颈癌筛查手段中的不足。DNA的异常甲基化是肿瘤发生过程中的早期事件，寻找和研究疾病特异性的新甲基化标志物，可以为宫颈癌筛查、诊断和治疗提供新的思路。

发明内容

本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出ZNF781基因在制备宫颈癌诊断试剂中的应用。

本发明还提出一种ZNF781基因甲基化的检测试剂。

本发明还提出一种含有上述ZNF781基因甲基化检测试剂的试剂盒。

本发明还提出一种上述ZNF781基因甲基化检测试剂或试剂盒的应用。

在本发明的一个方面，提出了ZNF781基因在制备宫颈癌诊断试剂中的应用。

在本发明的一些实施方式中，所述ZNF781基因为经甲基化的ZNF781基因。

在本发明的第二方面，提出了一种ZNF781基因甲基化的检测试剂，所述ZNF781基因甲基化检测试剂包括：序列如SEQ ID NO：1所示的正向引物和序列如SEQ ID NO：2所示的反向引物、序列如SEQ ID NO：4所示的正向引物和序列如SEQ ID NO：5所示的反向引物，和/或序列如SEQ ID NO：7所示的正向引物和序列如SEQ ID NO：8所示的反向引物。

在本发明的一些实施方式中，所述ZNF781基因甲基化检测试剂还包括核苷酸序列如SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：6和/或SEQ ID NO：9所示的荧光探针序列。所述SEQ ID NO：3所示的荧光探针序列为与如SEQ ID NO：1所示的正向引物和序列如SEQ ID NO：2所示的反向引物相匹配的荧光序列；所述SEQ ID NO：6所示的荧光探针序列为与如SEQ ID NO：4所示的正向引物和序列如SEQ ID NO：5所示的反向引物相匹配的荧光序列；所述SEQ ID NO：9所示的荧光探针序列为与如SEQ ID NO：7所示的正向引物和序列如SEQ ID NO：8所示的反向引物相匹配的荧光序列