[发明专利]筛选自身免疫性肝病药物的方法

说明书

本发明公开了一种筛选自身免疫性肝病药物的方法，包括：提供测试组动物和参照组动物，其中，所述测试组动物和所述参照组动物均包括自身免疫性肝病动物模型，其中，所述自身免疫性肝病动物模型的基因型为调节性T细胞条件性敲除腺苷‑磷酸活化蛋白激酶/载脂蛋白基因型；向所述测试组动物施用自身免疫性肝病候选药物；监测所述测试组动物的第一生化指标数据变化趋势和所述参照组动物的第二生化指标数据变化趋势；通过对比所述第一生化指标数据变化趋势和所述第二生化指标数据变化趋势，从所述候选药物中确定目标药物。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体设计一种筛选自身免疫性肝病药物的 方法。

背景技术

自身免疫性肝病是潜在威胁生命的慢性肝病，包括自身免疫性肝炎 (AIH)、原发性胆汁性肝硬化(PBC)、原发性硬化性胆管炎(PSC)和 最近发现的IgG4相关硬化性胆管炎。他们是由免疫系统攻击肝细胞或胆 管引起的，具有不同的机制和临床表现，但是确切的发病机制并不清楚。

动物模型是理解此类疾病的免疫发病机制的有力工具，成功构建动物 模型可以发现用于早期诊断的血清学标志物和免疫治疗靶点的目的。目前 已经开发出很多自身免疫性肝病的动物模型，大部分是小鼠模型，有转基 因的、化学诱导的和感染诱导的。然而，这些小鼠模型大部分都有一定的 局限性。

第一个自发性致死性AIH小鼠模型是NTxPD-1-/-小鼠模型，类似于 急性发作性AIH。然而这些老鼠在两周龄时就开始死亡，无法用于进一步 机制研究和药物治疗观察。AIH的小鼠模型除了自发模型还有一些替代抗 原诱导的模型和肝脏自身抗原诱导的模型。这些替代抗原诱导的AIH模型 是细胞因子依赖性和抗原非依赖性肝损伤模型，并且是急性的而不是慢性 的过程。肝脏自身抗原诱导的模型只能在NOD小鼠模型中诱导。PBC和 PSC的动物模型也分为自发模型和诱导模型。PBC的自发模型NOD.c3.c4 小鼠模型缺点在于表现出的肝损伤症状比人类更广泛，而诱导模型大多数 无法复刻PBC的组织学特征。PSC的自发模型Mdr2-/-小鼠模型的局限性 在于没有PSC的关键特征，而PSC的化学诱导模型同样缺乏PSC关键特 征并且由于化学药物的毒性较大，小鼠死亡率较高。这种动物模型应用于 自身免疫性肝病药物的筛选时，给予药物在小鼠体内代谢的周期过短，不 利于监测小鼠疾病发展过程以及药物对疾病发展过程的影响。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种筛选自身免疫性肝病药物的方法，包括：

提供测试组动物和参照组动物，其中，测试组动物和参照组动物均包 括自身免疫性肝病动物模型，其中，自身免疫性肝病动物模型的基因型为 调节性T细胞条件性敲除腺苷-磷酸活化蛋白激酶/载脂蛋白基因型；

向测试组动物施用自身免疫性肝病候选药物；

监测测试组动物的第一生化指标数据变化趋势和参照组动物的第二 生化指标数据变化趋势；

通过对比第一生化指标数据变化趋势和第二生化指标数据变化趋势， 从候选药物中确定目标药物。

根据本发明的实施例，上述筛选自身免疫性肝病药物的方法还包括：

经过预设时长后，处死测试组动物和参照组动物；

分别对测试组动物和参照组动物进行病理切片；

通过分析测试组动物和参照组动物的病理切片结果，从候选药物中确 定目标药物。

根据本发明的实施例，上述自身免疫性肝病动物模型的建立方法，包 括：

将载脂蛋白基因型小鼠与第一基因型小鼠按照预设比例进行交配，得 到第一代双基因杂合子小鼠；其中，第一基因型小鼠的基因型为调节性T 细胞条件性敲除腺苷-磷酸活化蛋白激酶基因型。