[发明专利]ADGRA2突变基因及其作为肺癌骨转移标志物的应用在审
| 申请号： | 202210959866.X | 申请日： | 2022-08-11 |
| 公开（公告）号： | CN116064791A | 公开（公告）日： | 2023-05-05 |
| 发明（设计）人： | 高方方;吴慧娟;鲁俊锋 | 申请（专利权）人： | 河南省肿瘤医院 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12N15/11;C12N15/12 |
| 代理公司： | 广州京诺知识产权代理有限公司 44407 | 代理人： | 轩青涛 |
| 地址： | 450008 *** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | adgra2 突变 基因 及其 作为 肺癌 转移 标志 应用 | ||
1.一种ADGRA2突变基因，其特征在于：NCBI登录号为NC_000008.11的DNA片段中的第37796883-37844896区域序列为野生型ADGRA2基因参考序列，参照NCBI登录号为NC_000008.11中的野生型ADGRA2基因序列，所述ADGRA2突变基因是由野生型ADGRA2基因发生g.18084_18086insGCT突变而形成的，突变所在基因片段的具体序列如SEQ ID NO：2所示，其余基因序列参照野生型ADGRA2基因序列；ADGRA2基因发生g.18084_18086insGCT的肺癌患者骨转移风险高。
2.如权利要求1所述的发生g.18084_18086insGCT突变的ADGRA2突变基因在构建肺癌患者骨转移分析的检测试剂盒和检测方法中的应用。
3.一种基于数字PCR的ADGRA2基因的g.18084_18086insGCT突变片段的检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒含有能够扩增ADGRA2基因的g.18084_18086insGCT突变片段的引物和探针，具体是如SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6序列所示的数字PCR扩增引物以及如SEQ IDNO：8序列所示的靶向g.18084_18086insGCT突变的检测探针。
4.一种基于数字PCR的ADGRA2基因的g.18084_18086insGCT突变片段的检测方法，其特征在于：所述ADGRA2基因突变的检测方法的主要步骤为：获取肺癌患者的癌灶组织或血液样本，以提取的样本DNA为模板，对于ADGRA2基因的g.18084_18086insGCT突变片段，采用如SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6序列所示的数字PCR引物进行扩增，采用如SEQ ID NO：8序列所示的靶向g.18084_18086insGCT突变基因的探针进行扩增和检测，扩增条件为：96℃预变性8min；95℃变性15s，59℃退火延伸30s，循环40次；98℃终反应10min；若肺癌患者样本中检出含有ADGRA2基因的g.18084_18086insGCT突变，则表示其为骨转移或骨转移高风险。
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