[发明专利]假单胞菌的分离、富集培养方法及修复污染土壤的方法

说明书

本申请公开了一种假单胞菌的分离、富集培养方法及修复污染土壤的方法。该假单胞菌的分离的方法包括：培养菌液步骤，将带有混合微生物群的水样加入到含盐度为1.5‑5%的营养肉汤中振荡培养，培养完成后将营养肉汤培养基中的菌液转接到PYCM培养基中继续培养；逐级稀释步骤，吸取PYCM中的菌液按菌液浓度梯度进行稀释；涂布步骤，将稀释后各浓度梯度的菌液等量均匀滴落在固体平板上表面，然后培养3d即可长出单个菌落；平板划线步骤，用接种环挑取单个菌落划线到固体平板上，反复多次划线传代培养，得到纯种菌株Pseudomonas sp.strain KW‑2。利用此菌株可有效提升砷和酞酸酯修复效果。

技术领域

本发明涉及土壤修复处理技术领域，具体为一种假单胞菌的分离、富集培养方法及修复污染土壤的方法。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

砷是一种类金属元素，广泛分布于自然界中，因其剧毒的氧化物——三氧化二砷(砒霜)而闻名。砷(As)属于毒性高的类金属元素，它具有很强的生物毒性及致畸、致突变作用，对人体健康以及动植物生长存在严重威胁，当人体摄入过量砷就会引起急性或慢性中毒，还可诱发皮肤癌、肺癌和膀胱癌。国际癌症研究机构确认砷是人类致癌物和神经毒物为国家农用地土壤污染风险管控必测项目之一。土壤砷污染来源十分广泛，主要由一些人为活动导致，包括杀虫剂的使用、除草剂和磷酸盐肥料的施放、半导体工业的发展、采矿和冶炼、制造业、燃煤、木材保存剂等。土壤砷污染具有隐蔽性、长期性和不可逆性等特点，土壤一旦遭受砷污染则其治理难度大且周期长。砷的自然来源主要通过人类活动进入生态系统，如化学肥料、杀虫剂的使用，以及采矿活动，都会促进砷在地下水和农田中的积累，且与大部分污染物最终流向海洋不同，砷经过一系列的转变后，最终都会在土壤中汇集。砷因为其剧毒性，被美国毒物与疾病登记署列为一类危险物质，危险程度高于镉、铅、汞等有毒金属。长期处于高砷的环境，会对人体健康造成严重伤害。砷的化合物可经过呼吸道、皮肤和消化道等被人体吸收。短时间内接触会引发急性砷化物中毒，亦可导致肺部水肿和脑部水肿；长期接触受砷污染的物质或食用受砷污染的作物会引起皮肤、肝脏的损害，也会导致神经衰弱，四肢麻木，引起基因突变，大大增加患癌风险。砷在土壤中主要以无机化合物存在，大多数的砷化合物以三价砷(As(III))和五价砷(As(V))的价态存在。其中，As(III)的毒性比As(V)高25-60倍，且迁移性更强。近年来，随着人们对含砷矿石的大规模开采，砷制剂在工农业生产中广泛应用，以及大量堆积的含砷废石、尾矿被氧化和淋滤溶解，造成砷元素的分解、迁移和扩散，导致土壤受到砷污染，对生态环境和人体健康造成潜在的威胁。

污染土壤治理依靠的现有技术主要有土壤淋洗、固化/稳定化、热处理、植物修复和微生物修复等技术。土壤淋洗通常是向土壤中投加各类淋洗剂(如有机或无机酸、碱、盐和螯合剂)，该方法不仅会破坏土壤原有的微团聚体结构，还会导致营养元素的淋失和沉淀，容易引起地下水污染，只适用于面积小污染重的土壤治理。热处理砷污染土壤时也会破坏土壤结构，同时也面临高处理成本和运行费用的问题。固化/稳定化技术在砷污染土壤工程治理中有较多的应用，如水泥包封固化、螯合剂稳定化、金属氧化物等无机材料吸附固化等，但一般药剂投加量通常在5％以上，一次成本高并容易产生二次污染等。植物修复法具有成本低、不破坏土壤原有结构、对土壤理化性质改变小的优点，但修复效率较低、修复周期长。微生物修复作为新兴的修复技术，具有效果好、经济、不会产生二次污染的优势，已被证明是有效的修复方法，受到了国内外研究者的关注。

砷(Ⅲ)的活性、毒性和迁移能力均强于砷(Ⅴ)，且有着更强的附着能力和移动性，因而在砷污染土壤的修复工作中首先考虑三价砷的去除。