[发明专利]一种阿特珠单抗-MMAD结合物及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种阿特珠单抗-MMAD结合物，其特征是，以阿特珠单抗作为抗体，以含马来酰亚胺的二肽类化合物作为连接子，以MMAD作为细胞毒素，所述抗体通过连接子将细胞毒素连接，所述连接子的化学结构式为：

所述MMAD的化学结构式为：

2.如权利要求1所述的阿特珠单抗-MMAD结合物，其特征是，连接子中的羟基与MMAD中的仲胺基通过形成连接；

或，阿特珠单抗与连接子通过形成硫醚键连接。

3.如权利要求1所述的阿特珠单抗-MMAD结合物，其特征是，化学结构式如下：

其中，mAb为阿特珠单抗，n为1～8；

优选地，n的平均值为3.6。

4.一种阿特珠单抗-MMAD结合物的制备方法，其特征是，包括以下步骤：

以二(对硝基苯基)碳酸酯作为偶联剂，将连接子与MMAD连接，获得连接子-MMAD偶联物；

采用硫醇还原剂对阿特珠单抗还原处理，使阿特珠单抗产生巯基，将带有巯基的阿特珠单抗与连接子-MMAD偶联物进行加成反应，即得；

所述连接子的化学结构式为：

所述MMAD的化学结构式为：

5.如权利要求4所述的阿特珠单抗-MMAD结合物的制备方法，其特征是，所述连接子-MMAD偶联物的化学结构如下所示：

优选地，其过程为：将连接子溶解，加入二(对硝基苯基)碳酸酯和N,N-二异丙基乙胺在室温条件下进行反应获得中间体化合物；将中间体化合物溶解，加入1-羟基苯并三唑、MMAD和N,N-二异丙基乙胺在室温条件下进行反应，即得；

或，阿特珠单抗与连接子-MMAD偶联物制成阿特珠单抗-MMAD结合物的过程为：阿特珠单抗的溶液中添加TCEP进行孵育，然后置于冰上，加入连接子-MMAD偶联物进行反应，即得。

6.一种连接子-MMAD偶联物，其特征是，其化学结构式如下所示：

7.一种药物制剂，包括活性成分及药学上可接受的载体，其特征是，所述活性成分为上述阿特珠单抗-MMAD结合物。

8.如权利要求7所述的药物制剂，其特征是，所述的药学上可接受的载体为水、生理盐水或缓冲溶液。

9.一种权利要求1～3任一所述的阿特珠单抗-MMAD结合物或权利要求7或8所述的药物制剂在制备肿瘤细胞活性抑制剂或抗肿瘤药物中的应用。

10.如权利要求9所述的应用，其特征是，所述肿瘤细胞为MC38、MDA-MB-231、A431、U-2OS、M059K、Caki-1、PC-9、U-937和/或Caski。