[发明专利]一种油杉体细胞胚发生体系的建立方法及其应用有效
| 申请号： | 202210983857.4 | 申请日： | 2022-08-17 |
| 公开（公告）号： | CN115299343B | 公开（公告）日： | 2023-05-09 |
| 发明（设计）人： | 韩学敏;曾庆银;王丹;金宇霆 | 申请（专利权）人： | 中国林业科学研究院 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00;C12N5/04 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 黄明光 |
| 地址： | 100091 *** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 体细胞 发生 体系 建立 方法 及其 应用 | ||
1.一种油杉体细胞胚发生体系的建立方法，其特征在于，所述方法包括：以未成熟合子胚为外植体进行诱导培养、增殖培养、调整培养和成熟培养，分化形成体细胞胚；
所述诱导培养、增殖培养、调整培养、成熟培养的基础培养基为改良1/2MS培养基；所述改良1/2MS培养基中KI4.1～4.2mg/L、H3BO315.4～15.6mg/L、VitaminB10.9～1.1mg/L、VitaminB60.9～1.1mg/L；
诱导培养基为：改良1/2MS培养基+2,4-D0.2～1mg/L+6-BA0.1～2mg/L+KT0～0.5mg/L+TDZ0～0.01mg/L+肌醇80～120mg/L+水解酪蛋白450～550mg/L+谷氨酰胺400～500mg/L+蔗糖25～35mg/L+琼脂6～8g/L；pH为5.8～6.2；
增殖培养基为：改良1/2MS培养基+2,4-D0.05～0.15mg/L+6-BA0.02～0.09mg/L+肌醇450～550mg/L+水解酪蛋白450～550mg/L+谷氨酰胺400～500mg/L+蔗糖25～35mg/L+琼脂6～8g/L；pH为5.8～6.2；
调整培养基为：改良1/2MS培养基+活性炭1～3g/L+肌醇450～550mg/L+水解酪蛋白450～550mg/L+谷氨酰胺400～500mg/L+蔗糖55～65mg/L+琼脂6～8g/L；pH为5.8～6.2；
成熟培养基为：改良1/2MS培养基+PEG400050～200g/L+ABA0.5～60mg/L+IBA0.1～0.3mg/L+活性炭1～3g/L+肌醇450～550mg/L+水解酪蛋白450～550mg/L+谷氨酰胺700～800mg/L+蔗糖55～65mg/L+琼脂8～10g/L；pH为5.8～6.2。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述合子胚处于原胚团时期、胚胎形成早期及胚胎形成晚期。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养条件为：黑暗条件，培养温度为19～23℃，培养过程中的相对湿度为60～75％。
4.权利要求1～3任意一项所述的方法在油杉扩繁和/或优异性状保持中的应用。
5.权利要求1～3任意一项所述的方法在油杉品种改良中的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国林业科学研究院，未经中国林业科学研究院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202210983857.4/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
