[发明专利]一种欧月组织培养繁殖方法在审
申请号: | 202210983929.5 | 申请日: | 2022-08-17 |
公开(公告)号: | CN115299344A | 公开(公告)日: | 2022-11-08 |
发明(设计)人: | 高运茹;苏阳;崔锦;郭娇娇;申彦平;牛云谱;闫庚戌;孟维英;崔泽华 | 申请(专利权)人: | 河北高泽科技有限公司;河北省林业和草原科学研究院 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 石家庄国钺天玺专利代理事务所(普通合伙) 13155 | 代理人: | 王朝 |
地址: | 050000 河北省石家庄市*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 组织培养 繁殖 方法 | ||
1.一种欧月组织培养繁殖方法,其特征在于,其包括如下步骤:
(1)选取生长健壮、无病虫害、芽体饱满的当年生嫩枝为外植体,剪成带2个芽眼,长1~2cm的茎段,剪去叶片和刺、保留1~3个叶柄,用小毛刷蘸中性洗衣粉将茎段洗刷干净,然后用自来水冲2~3h;
(2)在超净工作台上用75%酒精处理茎段30s,无菌水冲洗3~5次,随后用0.1%HgCl2或6%次氯酸钠对茎段进行消毒;
(3)茎段接种于初代培养腋芽诱导培养基,接种后置于23~27℃培养室,光照强度2000~2500lx,光照时间12~16h/d,培养20d。
(4)将步骤(3)处理得到的茎段接种于继代培养基,接种后置于23~27℃培养室,光照强度2000~2500lx,光照时间12~16h/d,培养40d;
(5)将步骤(4)处理得到的茎段接种于生根培养基,接种后置于23~27℃培养室,光照强度2000~2500lx,光照时间12~16h/d,培养40d。
2.根据权利要求1所述的一种欧月组织培养繁殖方法,其特征在于,使用0.1%HgCl2对茎段浸泡消毒5~15min。
3.根据权利要求1所述的一种欧月组织培养繁殖方法,其特征在于,使用6%次氯酸钠对茎段浸泡消毒15~25min。
4.根据权利要求1~3任一项所述的一种欧月组织培养繁殖方法,其特征在于,所述初代培养腋芽诱导培养基为包含6g/L琼脂、30g/L、100ul/L氢氧化钠的MS培养基,pH为5.8。
5.根据权利要求1~3任一项所述的一种欧月组织培养繁殖方法,其特征在于,所述继代培养基为包含1~3mg/L 6-BA和0.1~0.3mg/L NAA的MS培养基,pH为5.8。
6.根据权利要求1~3任一项所述的一种欧月组织培养繁殖方法,其特征在于,所述生根培养基为包含0.05~1mg/L NAA和IBA的1/2MS培养基,pH为5.8。
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